目的 观察雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin, mTOR)对人晶状体上皮细胞（human lens epithelial cells，HLECs）迁移能力的影响。
方法 选用HLECs-B3 细胞系分别与转化生长因子β2（transforming growth factor-β2，TGF-β2）、mTOR特异性抑制剂KU0063794及雷帕霉素（rapamycin）培养24h，Western blot法分别检测mTOR的表达及磷酸化水平。“划痕法”检测HLECs分别在TGF-β2、KU0063794和rapamycin单独处理，或KU0063794和TGF-β2、rapamycin和TGF-β2共同处理时的迁移能力。
结果 10ng/ml TGF-β2处理 HLECs 24h后，mTOR（2448、2481）的磷酸化水平升高；100nM的KU0063794和10ng/ml的rapamycin分别处理 HLECs 24h后，mTOR（2448、2481）的磷酸化水平降低；但总mTOR的表达水平均没有变化。与对照组相比，TGF-β2诱导mTOR（2448、2481）磷酸化激活后，能促进HLECs迁移（p=0.000）；KU0063794（p=0.000）和rapamycin（p=0.000）抑制mTOR（2448、2481）磷酸化激活后能抑制HLECs迁移（p=0.000），并且KU0063794抑制HLECs迁移能力的作用比rapamycin明显增强（p=0.000）；KU0063794和TGF-β2共同处理HLECs时，仍能显著抑制HLECs的迁移能力（与对照组相比p=0.000，与TGF-β2相比p=0.000）；rapamycin和TGF-β2共同处理HLECs时，其抑制HLECs迁移能力的作用较KU0063794和TGF-β2共同处理组弱（p=0.000），与对照组比较无显著性差异（P=0.944）。
结论 应用mTOR特异性阻断剂可抑制HLECs的迁移能力，证实mTOR磷酸化激活能促进HLECs迁移。 |
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