Nogo66-壳聚糖疫苗结膜接种对小胶质细胞活化的研究

目的探讨Nogo66-壳聚糖疫苗结膜接种后对视网膜小胶质细胞的免疫原性。
方法 1、体外实验：小胶质细胞株复苏传代，终浓度0.5ug/ml Nogo66-壳聚糖处理小胶质细胞，细胞免疫化学法检测小胶质细胞CD11b表达； 2、体内实验：选择正常成年SD大鼠30只，随机平均分为疫苗组、蛋白组和壳聚糖组，分别将Nogo66-壳聚糖疫苗、Nogo66蛋白溶液(1mg/ml)或壳聚糖溶液(1mg/ml)滴于结膜囊，第21天和第35天各加强点眼1次，共3次。于末次接种后14天，左心室灌注，
结果体外实验中Nogo66-壳聚糖疫苗、Nogo66蛋白刺激后，体外培养的小胶质细胞表达大量CD11b，细胞多呈现活化阿米巴样，胞体变大，胞核变圆，突起短粗；壳聚糖组小胶质细胞未见CDD11b表达。体内实验中疫苗组视网膜各层小胶质细胞活化，表达CD11b和少量MHC-Ⅱ，未见明显iNOS、TNF-α表达；壳聚糖组视网膜仅少量CD11b表达，未见iNOS、TNF-α表达。
结论 Nogo66-壳聚糖疫苗具有使小胶质细胞活化的免疫原性，经结膜接种后可激活视网膜小胶质细胞活化，识别抗原行使抗原递呈作用，但同时并不产生病理性的炎症因子。