目的 比较正常与氧化损伤视网膜色素上皮细胞（retinal pigment epithelium cell，RPE）的局部补体成分C3a及补体调节蛋白—补体因子F（complement factor H,CFH）的表达。
方法 利用人血清作为体外补体激活反应系统的来源，常规培养ARPE-19(ATCC，美国)细胞至细胞融合后，用500mM浓度H2O2对RPE细胞进行氧化损伤处理24h，未处理的细胞为正常对照组，将细胞用PBS洗涤后，加入适量血清在37℃反应60min，用ELISA测定血清中补体C3a的激活水平。另外将500mM 浓度H2O2处理24h的ARPE-19细胞分别用实时荧光定量PCR（real time RT-PCR），蛋白免疫印迹（western blot）检测ARPE-19细胞中CFH的mRNA和蛋白水平。
结果 ELISA结果显示H2O2处理后的ARPE-19细胞较正常组C3a的表达上升（P<0.05）。real time RT-PCR和western blot结果均表明ARPE-19细胞在H2O2作用下与正常未处理细胞相比（P<0.05），CFH的表达水平下降。
结论 氧化损伤RPE细胞能激活局部补体系统，成为启动补体激活的因素，另一方面也导致具有抑制补体系统激活效应的CFH表达下降，使RPE细胞局部补体系统调节失控从而激活补体系统，最终导致慢性炎症，这可能是老年性黄斑变性的病理机制。 |
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