目的 比较不同甘油保存方法对人眼角膜材料光学性质,生物力学性能,胶原纤维结构及抗原性的影响。
方法 将20个人眼角膜材料随机放入4种基于甘油的保存介质中,分别是:1)常温分子筛无水甘油,SRT;2)常温无水甘油,GRT;3)-20°C无水甘油,G20;4)-78°C无水甘油,G78。保存时间为6个月。复水后比较各组角膜材料间的差异,包括厚度,透明度,透光率,生物力学性能,胶原纤维形态及抗原性。
结果 大体照及透光率的结果均提示G78角膜透明性最佳,SRT角膜最差,各组的可见光透光率为G78>G203>GRT>SRT。膨胀法得到的应力应变曲线显示G78角膜材料最柔软,在特定的应力下,各组应变量为G78>G203>GRT>SRT。电镜结果显示,经过甘油保存后各组角膜材料基质细胞均浓缩裂解,但低温保存组胶原纤维排列规则,各层间紧密,位置关系清晰;而常温保存组则出现不同层度的胶原纤维错位,层间排列疏松,且存在局部崩解和变形,SRT组更为明显。免疫组化比较HLA-ABC,HLA-DR及CD45的表达情况,结果显示在所有的甘油保存组中三种蛋白的表达量及强度均明显降低,其中常温保存组降低更明显。
结论 通过甘油保存后,各组角膜材料基质细胞浓缩,抗原性均明显下降。在各种甘油保存方法中,深低温无分子筛无水甘油保存法可以维持角膜良好透明性和柔软度,且保护胶原纤维结构的完整性,是理想的角膜材料甘油保存方法。 |