目的 探讨一种可直接药物诱导转基因大鼠模型用于角膜缘干细胞研究的可行性。
方法 可Doxycycline直接诱导型GFP转基因大鼠 (ROSA26-rtTA-Col1a1- tetOP-H2BGFP) 模型被引入。GFP 基因的表达通过日常喂给水中添加Doxycycline直接激活，Doxycycline持续添加21天后停止。大鼠于1月和4月大被处以安乐死，这里的1月和4月指从开始喂给Doxycycline的日期到大鼠安乐死之间的间隔时间，安乐死大鼠在立体生物显微镜下行立体荧光照相，然后分别剜出左右眼球，左眼球进行冰冻切片，免疫组织化学染色研究；右眼球进行角巩膜铺片，荧光显微镜照相和激光共聚焦显微镜照相分析。
结果 GFP绿色可见荧光广泛表达于Doxycycline诱导的转基因1月大鼠的全身多个组织，眼表表达显著，且可见明显的高表达角膜缘条带。经Doxycycline诱导的转基因4月大鼠眼表GFP表达减退，但可见角膜缘表达强度仍高于周边角膜和中央角膜，漩涡状高表达条带连接角膜缘和角膜中央，经激光共聚焦显微镜分析，这些高表达条带内的细胞形状特殊，走行于角膜缘和角膜区翼状上皮细胞和基底上皮细胞之间。
结论 经Doxycycline诱导的4月转基因大鼠角膜缘区的GFP高阳性表达提示眼球表面分化缓慢的细胞群位于角膜缘，连接角膜缘和角膜中央的漩涡状GFP高表达条带中提示分化缓慢的细胞从角膜缘漩涡状移行入中央角膜，补给脱落的角膜上皮细胞。可Doxycycline直接诱导型转基因大鼠是研究角膜缘干细胞的有效模型。
| 
网友评论：（只显示最新10条。评论内容只代表网友观点，与本站立场无关！）