目的 研究5个典型人胚胎干细胞标记物碱性磷酸酶(ALP)、Nanog、Oct-4、阶段特异性胚胎抗原(SSEA)-1和SSEA-4在角膜缘上皮和角膜上皮的表达。
方法 可移植级别人角巩膜组织进行冷冻切片,免疫组织化学方法从蛋白水平检测ALP、Nanog、Oct-4、SSEA-1和SSEA-4在角膜缘上皮和角膜上皮的表达,RT-PCR法从mRNA水平进一步确认SSEA-4、Nanog和Oct-4在角膜和角膜缘的表达。
结果 免疫组织化学法研究显示SSEA-4广泛表达于角膜缘上皮和角膜上皮的各层,ALP散在表达于少量角膜缘前基质层细胞中。SSEA-4的表达经RT-PCR得到确认。免疫组织化学法和RT-PCR均显示SSEA-1和Oct-4不表达与角膜缘上皮和角膜上皮。RT-PCR在mRNA水平检测到Nanog在角膜缘和角膜的表达,但免疫组织化学法在蛋白水平未检测到Nanog在角膜缘和角膜的表达。
结论 SSEA-4广泛表达于成年角膜缘上皮和角膜上皮的各层中,提示SSEA-4不能作为一个理想的角膜缘干细胞标记物。Nanog是否表达于角膜和角膜缘仍需进一步确证。
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