目的 通过脱氧核苷酸末端转移酶介导缺口末端标记(TUNEL)染色观察氧诱导视网膜病变(OIR)小鼠模型中视网膜神经上皮层的细胞凋亡,探讨川芎嗪(TMP)对OIR中神经细胞凋亡的影响。
方法 将 48只C57BL/6新生幼鼠随机分为正常对照组(18只)、OIR对照组(18只)及OIR药物组(12只)。正常对照组在正常空气环境中饲养。OIR模型建立方法为将OIR对照组、OIR药物组幼鼠出生后7d置于含氧体积分数(75±3)%的氧气箱中连续生活5 d,至12 d回到正常空气环境中饲养。OIR药物组幼鼠出生后12~16 d腹腔注射TMP(200 mg/kg,1次/d),同时正常对照组、OIR对照组腹腔注射相同体积的生理盐水(含0.1% DMSO)。于12、14、17 d摘除幼鼠眼球作石蜡切片并行TUNEL染色,用Image Pro® Plus图像分析软件检测视网膜神经细胞凋亡数量。
结果 单因素方差分析及Bonferroni检验分析实验结果,P<0.05为差异具有统计学意义。出生后12 d,OIR对照组幼鼠视网膜TUNEL阳性细胞数量为正常对照组的6倍,(t=9.432,F=587.217,P<0.001)。出生后14 d,3组间幼鼠视网膜TUNEL阳性细胞数量均有显著差异(F=587.217,P<0.001);OIR对照组幼鼠视网膜TUNEL阳性细胞数量为正常对照组的28倍(t=49.813,P<0.001);OIR药物组幼鼠视网膜TUNEL阳性细胞数量较OIR对照组减少了82.3%(t=42.434,P<0.001)。出生后17d,3组幼鼠视网膜TUNEL阳性细胞数量无明显差异(t=0.684,P=0.494(OIR对照组vs.正常对照组);t=0.518,P=0.605(OIR对照组vs. OIR药物组);t=0.166,P=0.868(OIR药物组vs. 正常对照组);F=587.217)。
结论 TMP在氧诱导视网膜病变中有保护视网膜神经细胞和抑制凋亡的作用。 |