目的 探讨接受视网膜投射的上位视觉中枢神经元对急性、一过性眼压升高的早期反应性改变。
方法 采用右眼前房灌注的方法制作大鼠单眼急性高眼压模型。于术后1天、3天和7天处死动物,取眼球和大脑标本。利用尼氏染色的方法观察视网膜和上丘(superior colliculus, SC)的大体形态,测量视网膜内丛状层(inner plexus layer, IPL)的厚度,并计数距视乳头2mm范围内的视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells);同时对SC浅层神经元的横截面积和密度进行测量。脑组织切片行微血清白蛋白parvalbumin(PV) 染色以标记中继神经元,计数SC浅层PV阳性细胞数;通过western blot的方法对急性高眼压后SC的PV蛋白表达水平进行半定量分析。
结果 急性眼压升高后第1天,IPL厚度、RGC数量、SC神经元密度/细胞横截面积以及SC浅层PV染色与对照组相比皆无显著性差异。自损伤后第3天开始,视网膜和SC的大体结构及细胞形态同时出现明显改变:IPL逐渐变薄,其厚度在术后3天和7天分别为正常对照组的55.6%和33.2%;存活RGC的数目明显下降,在术后3天和7天分别为正常对照的54%和26%。接受损伤眼投射的左侧SC神经元发生萎缩,细胞横截面积明显下降(正常对照组92.115±11.12μm2,损伤后3天73.84±10.49μm2,损伤后7天71.129±12.28μm2),神经元的密度显示出增高的趋势(正常对照组3846±316/mm2,损伤后3天4763±387/mm2,损伤后7天6212±269/mm2)。正常对照组SC浅层的神经毡(neuropil)呈现PV免疫反应阳性,在此背景上散在的分布一定数量的PV阳性细胞(336±32/mm2)。术后3天及7天,左侧SC浅层神经毡PV染色明显下降,但PV阳性神经元的密度(损伤后3天586±85/mm2,损伤后7天665±185/mm2)却较正常对照组明显增加。Western blot的结果显示急性眼压升高后1、3、7天SC的PV蛋白表达水平和正常对照组相比无显著差异。
结论 急性眼压升高在引起视网膜损伤的同时还可以在早期即引起大脑神经元的反应性改变,主要表现为胞体萎缩,突起回缩以及细胞内功能蛋白分布的改变。全视路的神经保护可能为青光眼的治疗带来新的突破。 |