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氧对新生小鼠视网膜Samd4基因表达的影响 |
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作者:雷春涛 樊… 文章来源:四川省人民医院眼科 610072 点击数:1142 更新时间:2004/6/15
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目的 观察氧对新生小鼠视网膜血管增生的影响,及对TGFβ-Smad信号通路中关键的分子Samd4基因表达的影响,探讨视网膜新生血管形成的可能分子机制。 方法 两组出生7天的小鼠,一组进入密闭氧箱饲养5天,回到正常环境下继续饲养5天,制造视网膜新生血管形成的模型。另一组始终在正常环境下饲养。出生第17天时处死两组小鼠,摘取眼球固定后切片,行HE染色计数突破内界膜的内皮细胞数,用原位杂交和免疫组化分别检测小鼠视网膜组织Smad4 mRNA及蛋白表达情况。小鼠Smad4 mRNA探针序列:5’-Bio-GGT GGC GTT AGA CTC TGC CGG GGC TAA CAG-3’(1035-1064bp); Smad4多克隆抗体稀释度1:100。 结果 给氧组平均每个切面突破视网膜内界膜的内皮细胞数为22个,正常对照组少见,两者相比差异有极显著意义(P<0.01);免疫组化检测显示视网膜细胞胞浆Smad4蛋白表达明显增加,计算机扫描图象分析其平均灰度值为22.3±8.4(正常组8.1±3.2,P<0.05);原位杂交检测表明新生血管内皮细胞Smad4 mRNA表达增加(P<0.05)。 结论 氧致小鼠视网膜新生血管形成,伴随有内皮细胞Smad4蛋白表达增加,说明视网膜新生血管的发生与TGFβ-Smad信号通路有关。
关键词 摘要 目的 观察氧对新生小鼠视网膜血管增生的影响,及对TGFβ-Smad信号通路中关键的分子Samd4基因表达的影响,探讨视网膜新生血管形成的可能分子机制。 方法 两组出生7天的小鼠,一组进入密闭氧箱饲养5天,回到正常环境下继续饲养5天,制造视网膜新生血管形成的模型。另一组始终在正常环境下饲养。出生第17天时处死两组小鼠,摘取眼球固定后切片,行HE染色计数突破内界膜的内皮细胞数,用原位杂交和免疫组化分别检测小鼠视网膜组织Smad4 mRNA及蛋白表达情况。小鼠Smad4 mRNA探针序列:5’-Bio-GGT GGC GTT AGA CTC TGC CGG GGC TAA CAG-3’(1035-1064bp); Smad4多克隆抗体稀释度1:100。 结果 给氧组平均每个切面突破视网膜内界膜的内皮细胞数为22个,正常对照组少见,两者相比差异有极显著意义(P<0.01);免疫组化检测显示视网膜细胞胞浆Smad4蛋白表达明显增加,计算机扫描图象分析其平均灰度值为22.3±8.4(正常组8.1±3.2,P<0.05);原位杂交检测表明新生血管内皮细胞Smad4 mRNA表达增加(P<0.05)。 结论 氧致小鼠视网膜新生血管形成,伴随有内皮细胞Smad4蛋白表达增加,说明视网膜新生血管的发生与TGFβ-Smad信号通路有关。 |
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会议投稿录入:毛进 责任编辑:毛进 |
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