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| 表没食子儿茶素没食子酸酯对压力作用下的大鼠视网膜神经节细胞的保护作用 |
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作者：马晓华 文章来源：山东施尔明眼科医院 点击数：581 更新时间：2012/9/13 11:58:00 
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目的 研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对体外加压培养的大鼠视网膜神经节细胞（RGC-5）的保护作用。
方法 利用加压装置模拟青光眼性高眼压对RGC-5细胞造成损伤。通过MTT法筛选EGCG对体外加压培养的RGC-5的最佳用药浓度围,确定EGCG用药浓度。正常对照组RGC-5常规条件下培养；单纯加压组RGC-5在40mmHg压力下培养48小时；药物干预组RGC-5在给予40mmHg压力的同时给予0.1μm、0.5μm、1.0μm三种不同浓度的EGCG干预48小时。MTT法检测细胞活性、倒置相差荧光显微镜观察线粒体膜电位变化、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及Western blot检测解偶联蛋白-2（UCP-2）和超锰氧化物歧化酶(MnSOD)基因及蛋白表达量的变化。
结果 MTT检测结果显示:EGCG在浓度为0.08μm至2.5μm时可提高压力作用下细胞的细胞活性，而在0.1μm -1μm时作用最为显著。与单纯加压组细胞活性（67.53±2.12%）相比，0.1μm、0.5μm、1.0μmEGCG药物干预组细胞活性分别上升为90.14±2.45%（P<0.05）、86.36±2.33%（P<0.05）、85.25±1.92%（P<0.01）。倒置相差荧光显微镜观察细胞线粒体膜电位发现，正常细胞线粒体膜电位正常显黄色荧光，单纯加压组较正常细胞组及药物干预组细胞绿色荧光明显增强，线粒体膜电位明显升高。qRT-PCR结果显示：单纯加压组UCP-2、MnSOD基因表达量较正常细胞组明显降低，药物干预组较单纯加压组UCP-2、MnSOD基因相对表达量增高，单较正常细胞组均降低。Western blot结果显示：单纯加压组UCP-2、MnSOD蛋白表达量较正常细胞组明显降低，药物干预组较单纯加压组UCP-2、MnSOD蛋白表达量增高；差异均有统计学意义（P<0.05）。
结论 应用EGCG可以显著提高高压条件下RGC-5细胞的细胞活性，降低线粒体膜电位，提高细胞内UCP-2及MnSOD的表达水平，增强细胞抗氧化损伤能力，提示EGCG可以作为一种潜在的青光眼性视神经保护药物。 |
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| 会议投稿录入：毛进 责任编辑：毛进 |
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