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Edn2在高糖环境下的表达及对血管生成相关性因子的影响 |
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作者:杨侠 文章来源:山东省眼科研究所 点击数:280 更新时间:2012/9/13
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目的 通过检测Edn2(内皮素2)在高糖体外、体内环境下的表达,及Edn2干扰后血管相关因子的表达情况,探索Edn2在糖尿病视网膜病变中的作用及可能的机制。 方法 提取正常眼球及PDR患者玻璃体分别作为对照组(20例)和实验组(27例),应用Elisa方法检测玻璃体内End2含量;体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),分为常规培养的正常组和高糖培养的空白对照组(无处理)、阴性干扰组(Control siRNA)、阳性干扰组(Edn2 siRNA)。Elisa方法检测体外实验各实验组Edn2的表达情况;应用Real-time PCR,Western Blot方法分别检测各实验组中Edn2及血管生成相关因子Vegfa,Mmp2,Mmp9,Timp2基因及蛋白水平的表达情况。组间比较应用t检验(P<0.05)。 结果 临床标本中对照组无Edn2表达,实验组Edn2表达量为162.4294±21.61855 pg/ml,组间差异明显。体外实验中,Elisa结果显示Edn2在空白对照组和阴性干扰组高表达,在正常组表达极低,阳性干扰组与正常组表达相近;PCR、Western Blot结果显示Edn2在正常组无表达,在空白对照组和阴性干扰组高表达,在阳性干扰组低表达,Vegfa,Mmp9,Timp2均在空白对照组和阴性干扰组表达升高,在阳性干扰组表达较正常组下降。组间比较有统计学意义。Mmp2在本研究中无明显变化。 结论 临床及体外实验均证实高糖可致Edn2表达量升高,体外实验研究提示Edn2可能对血管生成因子Vegfa,Mmp9,Timp2有调控作用。 |
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会议投稿录入:毛进 责任编辑:毛进 |
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