nNOS和NIDD在DBA/2J小鼠继发性青光眼模型中的反应

目的  观察nNOS和NIDD在DBA/2J小鼠继发性青光眼模型中的表达情况。

方法  选择不同疾病进展期的DBA/2J小鼠，分别对实验鼠行裂隙灯眼前节照相，Tono pen眼压计行眼压测量，眼底照相，光学显微镜下对视网膜冰冻切片行视盘的形态学观察，实时定量PCR和免疫印迹方法检测nNOS和NIDD,mRNA和蛋白的表达情况，免疫组织化学检测nNOS和NIDD分子的空间分布，免疫荧光法检测nNOS和NIDD的共定位，最后用免疫印迹和免疫荧光方法检测NOS抑制剂对nNOS和NIDD表达的影响。

结果  鼠眼前节检查表明:DBA/2J小鼠随着疾病的进展逐渐发生虹膜色素播散，虹膜萎缩，虹膜透照可见瞳孔变形；眼压在青光眼前期开始升高，青光眼时眼压升至最高，随着疾病的进展，眼压又逐渐下降至对照组水平，各个疾病进展期的小鼠眼压有统计学意义；冰冻切片HE染色显示DBA/2J小鼠随着疾病的进展视乳头部位的凹陷逐渐明显，且视网膜神经节细胞数目有所减少；实时定量PCR和免疫印迹方法分析显示：nNOS和NIDD表达在青光眼时达到高峰，随着疾病的进展，两者表达又大致可回到基线水平；随着疾病的进展，免疫组织化学显示：nNOS和在内核层和RGC层有表达；免疫荧光法检测结果显示在DBA/2J小鼠青光眼期：nNOS与NIDD在RGC层有共定位，nNOS与cleaved caspase-3在RGC有共定位；应用非特异的nNOS抑制剂后减少了nNOS和活化的caspase-3的表达。

结论  随着青光眼疾病的进展，DBA/2J小鼠眼睛发生了一系列的病理改变，nNOS和NIDD随着疾病的进展在RGC层的表达量先增高后又又呈下降趋势。非特异的nNOS抑制剂通过减少nNOS，NIDD和活化的caspase的表达来抑制RGC的凋亡，在DBA/2J小鼠模型中NIDD调控的RGC的凋亡可能是通过活化nNOS起作用的。