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| 脂质体介导内皮抑素基因转染大鼠视网膜色素上皮细胞抑制脉络膜新生血管的实验研究 |
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作者：尚庆丽 马… 文章来源：河北医科大学第二医院眼科 050000 点击数：1539 更新时间：2004/6/16 
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| 目的: 探讨LipofectamineTM2000（LF2000）脂质体介导内皮抑素基因体内转染对CNV模型的抑制效应。方法: 雄性Brown Norway 大鼠60只，激光光凝方式建立CNV模型，随机分为内皮抑素治疗组，空质粒组，对照组，各组20只，以脂质体介导法将重组内皮抑素基因真核表达载体pSecTagA-h内皮抑素和空载质粒pSecTagA分别导入内皮抑素治疗组及空质粒组视网膜下腔，对照组注射生理盐水。采用原位杂交和免疫组化检测眼局部内皮抑素基因组mRNA转录及内皮抑素蛋白表达，ELISA法检测眼及血浆内皮抑素蛋白表达水平；通过脉络膜血管平铺激光共聚焦显微镜、FFA、CD105免疫组化、光镜等指标观察对CNV的抑制效应。结果: 经LF2000脂质体介导内皮抑素基因可有效转染视网膜内、外丛状层，视杆、视椎层，RPE及脉络膜并得到表达。转基因后7及14天测得眼组织匀浆内皮抑素蛋白表达量为506.14±63.41 ng /ml和331.5±42.21 ng/ml，血浆中内皮抑素表达量为25.6±4.65 ng/ml， 15.6±2.19ng/ml，而空质粒组和对照组内皮抑素表达量低于基准值（15.6pg）。内皮抑素治疗组，CNV面积小于空质粒组及对照组（F=285.13 ；P=0.004）；各光凝斑荧光渗漏程度评分结果，内皮抑素与空质粒组及对照组间差别具显著意义（x2= 11.54； P=0.002）；光镜检查，光凝后14天，空质粒组及对照组光凝区脉络膜层增厚，脉络膜毛细血管层内皮细胞大量增殖，光凝斑附近大量 CD105阳性表达细胞；内皮抑素组内皮细胞增生数量明显少于前两组， CD105 的阳性表达量明显降低。结论: 脂质体介导的内皮抑素基因体内转染可以有效抑制CNV的形成 |
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| 会议投稿录入：毛进 责任编辑：毛进 |
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