目的 在温度敏感性材料上培养脂肪源干细胞(Adipose-Derived Stem Cell, ADSCs)及口腔黏膜上皮细胞(Oral mucosal epithelial cells,OMECs),通过比较两种细胞体外的生长情况和生长特性,探求脂肪源干细胞作为重建眼表的种子细胞的可能性。 方法 异丙基丙烯酰胺溶于二丙醇加入35mm直径的培养皿,利用电子束照射制备温度敏感性培养皿。取兔脂肪组织及口腔黏膜,分别消化、离心获取原代细胞,ADSCs体外培养至二代后接种于温敏材料,原代OMECs直接接种于有丝裂霉素C处理过的鼠3T3生长的温敏材料中,比较两种细胞的形态、生长速度、细胞层片脱附时间、层片细胞计数、HE染色、干细胞荧光标志物ABCG2及角蛋白CK3/2P免疫染色,及扫描电镜检查。 结果 ADSCs镜下呈长梭形,OMECs呈鹅卵石外观,两者覆盖率达100%所需生长周期分别是10~12天、14~16天,20℃下脱附时间分别是45分钟、90分钟,HE染色前者呈单至双侧、后者呈3~5层,两者ABCG2、 CK3/2P均呈阳性,扫描电镜显示ADSCs细胞表面平滑、细胞间连接紧密,OMECs细胞可见典型微绒毛结构、细胞间连接紧密。 结论 脂肪源干细胞联合细胞层片技术可作为眼表重建的新途径。 |