目的 探索糖化终末产物受体(Receptor of Advanced Glycosylation End Products, RAGE)反义寡核苷酸抑制牛视网膜微血管内皮细胞(Bovine Retinal Endothelial Cells, BREC)糖化终末产物受体的表达。 方法 利用选择性培养基获得原代培养牛视网膜微血管内皮细胞,取第二代内皮细胞,观察5’-FAM标记的硫代磷酸修饰型RAGE反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide, ASODN)复合物(RAGE-ASODN),经阳离子脂质体(cationic liposome, CL)介导转染后,在牛视网膜微血管内皮细胞(BREC)中的时相分布。按照所观察的ASODN在细胞内的分布时相,应用逆转录PCR方法,观察了糖化终末产物(Advanced Glycosylation End Products, AGEs)干预12h后,对BREC中RAGE mRNA表达的影响以及ASODN的干预作用。 结果 AGEs上调了BREC中RAGEmRNA的表达(relative IOD=1.337±0.104),与BSA对照组(relative IOD=0.227±0.060)比较有显著差异(P<0.001); 内皮细胞给予ASODN的干预组, RAGEmRNA表达减弱(relative IOD=0.398±0.059),与AGEs干预组比较有统计学意义(P<0.001);而给予正义寡核苷酸(sense oligodeoxynucleotide, SODN)的干预组,RAGEmRNA水平(relative IOD=1.242±0.096)与单纯AGEs组无明显差异(P>0.05)。结论 反义寡核苷酸可以下调内皮细胞由于AGEs诱导的RAGE mRNA水平的变化,提示阻断RAGE的异常表达,对防治糖尿病视网膜病变,将是一个有希望的干预途径。
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