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藏红花素对缺氧环境下 Wistar大鼠视网膜Müller细胞活性和胶质纤维酸性蛋白表达的影响 |
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作者:郭斌 文章来源:解放军第八十一医院 点击数:212 更新时间:2012/9/13
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目的 检测不同浓度藏红花素对视网膜Müller细胞(RMC)增生和活性情况,观察藏红花素对缺氧条件下环境下RMC活性和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响。 方法 改良Reichenbach等方法原代培养Müller细胞,并采用GFAP和Vimentin染色鉴定RMC。RMC培养基中加入终浓度10μmol/L、50μmol/L和100μmol/L 藏红花素,于1~7d计数细胞,于24h和48h台盼蓝染色测定细胞活性,对照组RMC培养基中未加入藏红花素。培养液中加入终浓度为200 μmol/L的 CoCl2建立化学缺氧模型。实验分4组:缺氧组(H)、藏红花素处理组(C)、缺氧+ 藏红花素处理组(HC)和正常对照组(NC),其中C和HC组培养液中加入10μmol/L藏红花素。处理24h,台盼蓝染色检测细胞活性,采用Western blot法半定量检测GFAP的表达。 结果 含10μmol/L和50μmol/L crocin的培养液中,细胞生长无抑制;100μmol/L crocin的培养液中细胞增生受到抑制,培养24h和48h RMC活性分别为68%±7%、59%±9%,与对照组相比,明显降低(t24h=3.723,P<0.05;t48h=4.103,P<0.05)。在缺氧条件下,正常细胞和10 μmol/L crocin的培养液中细胞活性受到明显抑制,crocin可减轻缺氧环境对细胞活性抑制作用。在缺氧条件下,GFAP表达明显升高(t=2.945,P<0.05);crocin可部分抑制GFAP高表达(t=3.362,P<0.05)。 结论 缺氧能诱导体外培养视网膜Müller细胞死亡,适合浓度藏红花素可抑制缺氧诱导的视网膜Müller细胞死亡。 |
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会议投稿录入:毛进 责任编辑:毛进 |
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