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藏红花素对缺氧环境下 Wistar大鼠视网膜Müller细胞活性和胶质纤维酸性蛋白表达的影响           ★★★
藏红花素对缺氧环境下 Wistar大鼠视网膜Müller细胞活性和胶质纤维酸性蛋白表达的影响
作者:郭斌 文章来源:解放军第八十一医院 点击数:212 更新时间:2012/9/13
目的 检测不同浓度藏红花素对视网膜Müller细胞(RMC)增生和活性情况,观察藏红花素对缺氧条件下环境下RMC活性和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响。
方法
改良Reichenbach等方法原代培养Müller细胞,并采用GFAPVimentin染色鉴定RMCRMC培养基中加入终浓度10μmol/L50μmol/L100μmol/L 藏红花素,于1~7d计数细胞,于24h48h台盼蓝染色测定细胞活性,对照组RMC培养基中未加入藏红花素。培养液中加入终浓度为200 μmol/L CoCl2建立化学缺氧模型。实验分4组:缺氧组(H)、藏红花素处理组(C)、缺氧+ 藏红花素处理组(HC)和正常对照组(NC),其中CHC组培养液中加入10μmol/L藏红花素。处理24h,台盼蓝染色检测细胞活性,采用Western blot法半定量检测GFAP的表达。
结果
10μmol/L50μmol/L crocin的培养液中,细胞生长无抑制;100μmol/L crocin的培养液中细胞增生受到抑制,培养24h48h RMC活性分别为68%±7%59%±9%,与对照组相比,明显降低(t24h=3.723P0.05t48h=4.103P0.05)。在缺氧条件下,正常细胞和10 μmol/L crocin的培养液中细胞活性受到明显抑制,crocin可减轻缺氧环境对细胞活性抑制作用。在缺氧条件下,GFAP表达明显升高(t=2.945P0.05)crocin可部分抑制GFAP高表达(t=3.362P0.05)
结论
缺氧能诱导体外培养视网膜Müller细胞死亡,适合浓度藏红花素可抑制缺氧诱导的视网膜Müller细胞死亡。
会议投稿录入:毛进    责任编辑:毛进 
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