目的 研究体外缺氧刺激后视网膜Müller细胞是否存在未折叠蛋白反应(unfolded protein reaction,UPR),及其与L-谷氨酸/L-天门冬氨酸转运体(glutamate-aspartate transporters,GLAST)的关系。 方法 出生3~7d大鼠视网膜组织采用胰酶消化法培养视网膜Müller细胞,氯化钴(Cocl2)200μmol·L–1对视网膜Müller细胞进行体外缺氧干预,干预时间为0 h、3 h、6 h、12 h、24 h、48、72 h;UPR诱导剂二硫苏糖醇(DTT)2mmol·L–1刺激视网膜Müller细胞为阳性对照,干预时间为0h、3h、6h、12h、24h、48h、72 h。采用实时定量PCR检测GLAST与UPR相关因子XBP1、CHOP的表达及相关性。 结果 视网膜Müller细胞鉴定:免疫荧光染色示90%以上细胞GS、GLAST表达阳性;流式细胞技术Müller细胞的GLAST表达阳性率为(84.66±3.51)%。缺氧刺激后,GLAST与XBP1、CHOP在Müller细胞上均有表达,缺氧早期呈上升趋势,干预后24h表达最强,后呈下降趋势。与DTT组表达趋势一致。 结论 体外缺氧刺激后视网膜Müller细胞存在UPR,其相关因子的变化与GLAST的变化趋势一致,揭示UPR可能是调控GLAST变化的原因之一。 |