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| 调控bfgf基因转染的成肌细胞治疗鼠眼外肌损伤的研究 |
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作者：张立贵 文章来源：滨州市沪滨眼科医院 点击数：242 更新时间：2012/9/13 
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目的 探讨将调控bfgf基因转染的成肌细胞移植到损伤后的鼠眼外肌组织中，四环素调控目的基因表达损伤肌肉的修复情况。
方法 1通过夹持法损伤鼠眼外肌。2将转染了pcDNA4/TO/myc-HisTMA-bFGF的成肌细胞注入试验组受损的鼠眼外肌中，并根据术后不同时段给或不给四环素分亚组，同时设对照，未损伤者为正常组。3胶体金标记法检测注入的成肌细胞在肌肉中的成活情况。4移植细胞肌肉的修复情况。5采用ABC-ELISA法检测目的基因bfgf在受损鼠眼外肌中的表达分泌情况。6采用Bradford比色法测定MyoD、JNK1和p38的蛋白含量，探索移植细胞在组织中的生长，迁徙和分化情况。
结果 病理证实成功建立了鼠眼外肌损伤动物模型，光镜和电镜下，胶体金标记的成肌细胞移植到鼠眼外肌后，与宿主眼肌生长为一体；不同时象点1w、2w、3w、4w给四环素的试验组1与对照组1比较，1w时试验组1肌组织的损伤炎症反应明显比对照组1轻，2w时可见大量的成肌细胞出现，3w时产生大量的肌纤维，4w时肌增生良好，瘢痕不明显；对照组1在1w时炎症反应明显，2w时出现大量的成纤维细胞，3w时产生大量的胶原纤维，4w时损伤部分基本被瘢痕组织代替。试验组给四环素3d后bfgf的含量明显高于不给药组，2w时达高峰，持续4w之久，半途停药后则迅速降低，半途给药后又迅速增高，更高于相应时段的对照组（P<0.01），正常组、对照组和试验组bfgf含量在相应时象点依次增加。MyoD和p38蛋白含量的变化和bfgf蛋白含量的变化成正相关性。JNK1蛋白的含量表现比较特殊，试验组和对照组的含量皆明显高于正常组（P<0.01），但对照组的含量最高，与试验组bfgf基因高表达相应时象点比较有显著性差异（P<0.01），即试验组bfgf基因高表达时JNK1蛋白的含量反而降低。
结论 （1）转染了pcDNA4/TO/myc-HisTMA-bFGF的成肌细胞注入受损的鼠眼外肌中能够成活，增值和分化。（2）四环素可以比较灵敏的调节bfgf基因在活体的表达，分泌bfgf蛋白，有效地修复眼外肌的损伤。（3）在移植成肌细胞bfgf基因表达产生的bfgf主导的肌损伤修复过程中，MyoD的表达是增强的，同时可能与MAPK家族 p38表达增加，JNKI表达降低有关。 |
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| 会议投稿录入：毛进 责任编辑：毛进 |
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