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人泪腺腺样囊性癌细胞系建立的初步研究           ★★★
人泪腺腺样囊性癌细胞系建立的初步研究
作者:何彦津 文章来源:天津医科大学眼科中心 点击数:234 更新时间:2012/9/13
目的 探索人泪腺腺样囊性癌细胞的原代培养方法,初步了解其形态学特点及生物学特点,为进一步建立稳定的永生细胞系奠定前期基础。
方法 取本单位泪腺腺样囊性癌患者的术后标本,采用组织块培养法获得原代细胞。通过连续传代、机械刮除、反复贴壁、和消化排除等方法去除杂细胞。利用相差显微镜、扫描电镜、透射电镜等观察细胞形态。细胞免疫化学法检测细胞vimentindesminS-100cytokeratinCD34等蛋白的表达。绘制细胞生长曲线,计算细胞倍增时间。
结果 原代培养第5天开始见组织块周围细胞爬出,第32天第一次传代,第69天发现典型的上皮样细胞克隆。综合运用连续传代、机械刮除、反复贴壁、和消化排除等方法去除杂细胞,至第8代细胞基本纯化。纯化后细胞已稳定传至50余代。相差显微镜下观察细胞融合时呈典型的“铺路石”样生长,细胞可重叠生长,出现接触抑制。扫面电镜和透射电镜下细胞呈现低分化恶性肿瘤细胞的典型特点,细胞间信号沟通复杂。细胞免疫化学法vimentinS-100cytokeratin蛋白呈阳性,desminCD34蛋白呈阴性。细胞生长呈现类似“S”形曲线,细胞倍增时间37.1h
结论 采用组织块培养法可能获得稳定传代的人泪腺腺样囊性癌细胞,细胞系的建立有可能通过此方法获得成功。
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