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透明质酸钠在角膜保存中的实验研究 |
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作者:杨娟 赵… 文章来源:重庆医科大学应用技术学院附属医院眼科 400016 点击数:1511 更新时间:2004/6/17
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目的:研究透明质酸钠(SH)在角膜保存中的作用,探讨其在短期和中期角膜保存中对角膜内皮细胞结构和功能的影响,以期改进角膜保存的方法和提高保存角膜的质量。
方法:1.短期保存:新鲜兔眼分三组:⑴A组:前房内注入1% SH 0.25ml ;⑵B组:对照;⑶C组:前房内注入过滤空气 0.25ml。放入湿房容器4℃保存。分别于保存后24、48、72、96 h对角膜行大体形态和裂隙灯显微镜观察,活体内皮显微镜检查,苔盼兰-茜素红染色检测。2.中期保存:自制改良中期保存液MMK(参考M-K液配方),再加入SH,制成保存液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ(SH浓度分别为0.05%、0.03%、0.01%),于4℃下保存,未加SH的MMK液作对照。于保存3、5、7、10 d,行苔盼兰-茜素红染色,酶组织化学染色检测SDH、G-6-P酶活性,TEM和SEM观察角膜内皮细胞超微结构变化。
结果:1.短期保存:保存后24h:A组角膜透明度高,B组角膜轻度水肿增厚;48h:A组角膜仍很透明,角膜内皮细胞形态好数量多,而B组眼球变软,前房变浅,角膜明显混浊水肿,角膜内皮细胞明显减少并有较多黑区,与A组比较有显著性差异(P<0.01);72、96h:A组角膜仍透明,仅轻微水肿(96h),角膜内皮细胞数量较多形态较好,而B组眼球明显变软甚至塌陷,角膜严重混浊水肿,,内皮镜检查成像不清不能计数。C组保存效果次于A组但好于B组。三组保存后内皮细胞苔盼兰-茜素红染色比较,以A组最好,C组次之,B组最差,统计学处理有显著性差异(P<0.01)。
2.中期保存:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组保存3天时,角膜透明,而对照组则出现水肿,透明度降低;第5、7天时,实验组可见轻度水肿,而对照组则明显水肿增厚,角膜透明度差。Ⅰ组(0.05%SH)与同期各组比较,其角膜片的透明度最好,水肿最轻。内皮细胞苔盼兰-茜素红联合染色比较,Ⅰ组最高,对照组最低,各组间比较有显著性差异(P<0.01);SDH和G-6-P酶染色平均透光密度值比较,各组间也有显著性差异(P<0.01)。TEM和SEM观察Ⅰ组和对照组保存3、5、7d的角膜细胞的超微结构,其形态和亚细胞结构完整性变化均有明显差别。
结论:SH在角膜保存中,对角膜内皮细胞可起到明显的保护和稳定作用,SH用于角膜短期和中期保存,可显著提高保存角膜的质量,延长保存时间,中期保存的作用与SH在保存液中的浓度有关。
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会议投稿录入:毛进 责任编辑:毛进 |
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