目的 建立体外Wistar大鼠视网膜神经元培养体系及高糖模型。
方法 1、取生后1～3天的Wistar大鼠视网膜，用0.05%胰酶进行消化制备原代视网膜细胞悬液，用DMEM培养基进行接种培养、Neurobasal培养基进行维持培养，尼氏染色法、抗神经丝蛋白重链(NF)免疫细胞化学染色法进行神经元的鉴定。2、以0、5.5、15、25、35mmol/L不同浓度葡萄糖分别作用于原代培养的Wistar大鼠视网膜神经元24、48、72h，采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法及流式细胞仪分析检测神经元的存活率、凋亡率，确定葡萄糖最适干预浓度及时间，建立原代培养的大鼠视网膜神经元的高糖模型。
结果 1、培养5～7d大鼠视网膜神经元经尼氏染色后，神经元比例达79.86%。经免疫细胞化学染色显示，抗NF抗体反应阳性的细胞占71.53%。2、随葡萄糖浓度的增加及时间的延长，视网膜神经元的存活率下降、凋亡率增多，以35mmol/L葡萄糖干预72h的神经元存活率(OD值：0.0268±0.0116)下降、凋亡率(40.123±7.576%)增加最为显著（p<0.01）。
结论 1、原代培养的Wistar大鼠视网膜神经元体系是一种稳定可靠、以神经元为主体的细胞体系。2、35mmol/L葡萄糖干预大鼠视网膜神经元72h，可做为模拟体内早期糖尿病视网膜神经元病变的细胞模型。