目的 通过P65表达质粒及NF-κB圈套核苷酸小梁细胞的转染,从正反两个方面研究NF-κB对小梁细胞MMP及TIMP mRNA表达的影响。 方法 取原代培养的小梁细胞随机分为5组:正常对照组、pRSV-RelA质粒组、质粒对照组、NF-κB圈套核苷酸组、圈套对照组,分别给予对应质粒或圈套转染后,RT-PCR法检测各组小梁细胞MMP mRNA、TIMP mRNA的表达。 结果 P65质粒转染24小时后,小梁细胞MMP-1 mRNA的表达值(与GAPDH的比值)(1.07±0.05)显著高于正常对照组(0.92±0.04)及空质粒对照组(0.92±0.03),P<0.05;MMP-3 mRNA的表达值(与GAPDH的比值)(1.216±0.1)亦高于正常对照组(0.743±0.137)及空质粒对照组(0.843±0.061),P<0.05;MMP-2 mRNA、TIMP-1 mRNA及TIMP-2 mRNA的表达值与正常对照组及空质粒对照组分别无显著差异,P>0.05。NF-κB圈套核苷酸转染24小时后,小梁细胞MMP-1 mRNA的表达值(0.72±0.08)低于正常对照组(0.92±0.04)及随机圈套对照组(0.9±0.05),P<0.05;MMP-3 mRNA的表达值(0.497±0.057)低于正常对照组(0.743±0.137)及随机圈套对照组(0.767±0.041),P<0.05;MMP-2 mRNA、TIMP-1 mRNA及TIMP-2 mRNA的表达值(0.881±0.046)分别与正常对照组及随机圈套对照组无显著差异,P>0.05。 结论 P65质粒转染小梁细胞促进MMP-1及MMP-3的表达,对MMP-2,TIMP-1及TIMP-2的表达无影响。提示NF-κB活化可促进MMP-1及MMP-3的表达。NF-κB可促进小梁细胞MMP-1及MMP-3的表达;对小梁细胞MMP-2、TIMP-1及TIMP-2的表达没有影响。提示长期应用NF-κB抑制剂可能会导致小梁细胞MMP-1及MMP-3的分泌下降。 |