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| 苦参碱对耐长春新碱的视网膜母细胞瘤的增殖抑制作用研究 |
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作者：赵博文 文章来源：首都医科大学附属北京同仁医院 点击数：281 更新时间：2012/9/13 
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目的 苦参碱是从中药苦参根中提取的生物碱，本实验将苦参碱对耐长春新碱视网膜母细胞瘤细胞增殖的抑制作用及其相关机制进行研究，探讨苦参碱应用于视网膜母细胞瘤治疗的前景。
方法 体外培养非耐药细胞株SO-Rb50和耐药细胞株SO-Rb50/VCR细胞，CCK-8法测定0.2～1.1mg/ml苦参碱作用于两株细胞24h后对细胞增殖的抑制作用，并分别计算得出半数抑制浓度（IC50浓度）。然后对两株细胞未加药组和IC50浓度的苦参碱作用12h、24h和48h后组，①通过流式细胞仪分别测定其细胞周期的改变情况；②通过TUNEL法分别测定其细胞凋亡率并进行荧光染色定位观察；③通过Western-Blot检测细胞周期和细胞凋亡相关蛋白的表达水平；④通过透射电镜观察细胞超微结构改变。
结果 在加入0.2-1.1mg/ml苦参碱24小时后，非耐药细胞株SO-Rb50和耐药细胞株SO-Rb50/VCR细胞的增殖抑制率相似，其半数抑制浓度（IC50浓度）分别为SO-Rb50：0.96± 0.04 mg/mL，SO-Rb50/VCR：0.97± 0.08 mg/ml。IC50浓度苦参碱作用12h、24h和48h后的两株细胞中：①G0-G1期和细胞比例显著增高，同时S期的细胞比例显著下降。②细胞的凋亡率明显增加，TUNEL和DAPI染色证实在细胞核发生DNA断裂。③通过WesternBlot实验检测出细胞周期相关蛋白P21和P27表达水平上调，cyclinD1表达水平下调；细胞凋亡相关蛋白bcl-2表达水平下调而bax表达水平上调，细胞株β-action表达各组之间没有差异。以上检测结果两细胞无明显差别。④电子显微镜下均可见到较为明显的细胞变性和细胞凋亡发生。
结论 苦参碱对体外培养的视网膜母细胞瘤细胞及其耐长春新碱细胞株的增殖有抑制作用，这种作用呈浓度依赖性，其作用机制与细胞周期调控和诱导细胞凋亡有关。
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| 会议投稿录入：毛进 责任编辑：毛进 |
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