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microRNA对角膜内皮老化以及细胞密度下降的转录调控机           ★★★
microRNA对角膜内皮老化以及细胞密度下降的转录调控机
作者:王晔 文章来源:山东省眼科研究所 点击数:317 更新时间:2012/9/13
目的:随年龄增加人角膜内皮老化且细胞密度呈生理性下降。由于小鼠的角膜内皮细胞密度与人相似,也呈生理性年龄相关性下降,因此本研究以小鼠为模式生物探讨microRNA对角膜内皮老化以及细胞密度下降的转录调控机制。

方法:分别取6-8周龄小鼠与1年鼠龄小鼠角膜内皮提取总RNA后反转录为cDNA,采用microRNA芯片检测调控小鼠角膜内皮老化的microRNA,针对差异显著的microRNA行荧光定量PCR验证。生物信息学分析靶基因。荧光素酶报告基因验证microRNA与靶基因的相互作用。

结果 microRNA芯片结果显示6-8周龄小鼠角膜内皮高度表达的miR-190miR-194 miR-31在衰老小鼠角膜内皮的表达显著性下降(p0.05),该结果提示miR-190miR-194 miR-31及其靶基因对角膜内皮的老化具有重要的调控作用。荧光定量PCR验证结果表明miR-190miR-194 miR-31在衰老小鼠角膜内皮的表达显著性下降(p0.05),该结果与芯片结果一致。生物信息学分析表明miR-190miR-194 miR-31共同调控Trp53inp1/2基因,且荧光素酶报告基因的结果也证明miR-190miR-194 miR-31的靶基因是Trp53inp1/2WB证明,Trp53inp1/2基因通过调控下游的p53基因及其信号通路实现其对角膜内皮老化过程的调控。

结论:通过对小鼠角膜内皮老化模型的microRNA表达谱的研究表明miR-190miR-194 miR-31通过调控Trp53inp1/2的表达,激活下游p53基因及其信号通路,调控角膜内皮老化。

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