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牛膝多肽视网膜神经节细胞保护作用的机制研究           ★★★
牛膝多肽视网膜神经节细胞保护作用的机制研究
作者:胡楠 文章来源:南通大学附属医院 点击数:367 更新时间:2012/9/13
目的  探讨牛膝多肽(ABPP)对谷氨酸诱导的视网膜神经节细胞损伤的保护作用及机制。
方法  星形孢菌素(SS)诱导RGC-5细胞分化,免疫荧光染色检测视网膜神经节细胞(RGCs)特异性蛋白Thy-1的表达量作为成功分化的标志。实验设对照组、谷氨酸组和不同剂量ABPP+谷氨酸组(ABPP0.050.55.0µg/ml)。MTT法测定处理后细胞存活率;AnnexinV/PI双染色法定量观察细胞凋亡率;Fluo4/AM测定细胞内钙离子内流;TBARS定量分析法测定细胞内脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量;流式细胞术测定细胞内活性氧自由基(ROS)和线粒体膜电位水平;蛋白免疫印迹法测定活化caspase-3及磷酸化MAPK相关蛋白水平。 
结果  1SS能够诱导RGC-5细胞分化,表现为RGCs特异性蛋白Thy-1表达量上升和细胞形态趋于神经元样。(2)与谷氨酸组比较,0.5µg/ml ABPP可有效提高RGC-5细胞存活率,减少细胞凋亡。(3ABPP能抑制钙离子内流、减少ROSMDA产生、提高线粒体膜电位。(4ABPP能部分抑制caspase-3p38 MAPK蛋白活化。 
结论 ABPP可抑制谷氨酸诱导的视网膜神经节细胞凋亡,其保护机制可能与抑制钙离子内流,从而进一步抑制由钙离子内流引起的细胞脂质过氧化,提高线粒体膜电位有关,并与p38 MAPK通路有一定联系。
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