目的 成年哺乳动物的睫状体边缘区含有视网膜干细胞(Retinal stem cell,RSC),RSC在体外增殖能力强,且可以分化为几乎所有视网膜细胞,但在体内的增殖及分化能力有限。成年哺乳动物视网膜的抑制性环境可能是抑制RSC增殖分化的关键因素。故本研究旨在研究内源性分子EphrinA3对成年哺乳动物RSC增殖分化的调控作用。 方法 用免疫组化和蛋白印迹法检测小鼠眼球EphrinA3的表达部位和表达趋势,并且以EphrinA3基因敲除小鼠和野生型小鼠为模型,进行活体BrdU玻璃体腔注射,观察在体RSC的增殖分化能力,并且体外培养两种小鼠的RSC比较它们的增殖和分化能力。 结果 EphrinA3表达于视网膜及睫状体上皮细胞,并随小鼠生长发育表达增强,在成年期达到最高峰。敲除EphrinA3基因后,体内及体外实验均证实RSC增殖能力有所提高。RT-PCR证实敲除EphrinA3基因的RSC表达更高水平的神经干细胞标记物(Sox2)和感光细胞前体细胞标记物(Crx, Nrl and Nr2e3)。EphrinA3基因敲除后的RSC更容易分化为视网膜神经细胞及感光细胞。 结论 EphrinA3是成年小鼠体内对RSC增殖分化有抑制性作用的内源性调控分子。 |