目的  我们以往的研究显示在rd小鼠遗传性视网膜变性过程中，小胶质细胞活化及CC趋化因子表达增加早于或与感光细胞凋亡一致，提示上述炎性因子在视网膜变性中发挥重要作用，CC趋化因子可能是小胶质细胞活化的重要信号物质。本研究的目的是进一步探讨小胶质细胞表面趋化因子受体活化产生细胞毒性物质导致感光细胞凋亡的病理机制。

方法  体内实验以出生后8、10、12、14、16及18天的rd小鼠及同龄对照C57BL/6N小鼠为研究对象。RNA酶保护实验测定不同鼠龄rd鼠CC趋化因子受体CCR1，CCR2，CCR3，CCR5mRNA在视网膜中的表达水平；免疫组织化学法测定其蛋白表达及组织定位。gp91^phox在视网膜中的表达由Realtime-PCR、westernblot及免疫组织化学法确定。小胶质细胞趋化因子受体、gp91^phox与小胶质细胞标记物共定位确定其细胞来源及相关性。体外实验CC趋化因子刺激BV-2小胶质细胞表面受体的活化由钙流检测证实。上清中ROS由SOD抑制性细胞色素减少法测定。BV-2细胞活化对661W感光细胞的毒性作用由TUNEL及MTT法测定。体外实验观察CC趋化因子抑制剂met-RANTES对661W感光细胞的保护作用。

结果   CCR1，CCR3及CCR5mRNA在各鼠龄rd小鼠视网膜中表达增加，并与感光细胞凋亡一致，。CCR5主要表达在rd小鼠外层视网膜活化的小胶质细胞中，其表达水平与该细胞活化程度一致。与对照鼠相比，gp91^phox自rd小鼠出生后10天在小胶质细胞中表达升高，12天-14天达到高峰。大部分CCR5与gp91^phox在小胶质细胞中共定位。体外实验20ng/ulRANTES， MCP-3及MIP-1β分别刺激结构性表达CCR5的BV-2细胞，均有不同程度的细胞内钙流出现，上清中产生的ROS水平分别为17865.64、16931.46及18120.55，较对照组明显增加。其上清分别处理661W细胞，凋亡细胞出现的百分比分别为20%,10%及15%。met-RANTES可减少RANTES及MIP-1β刺激引起的BV-2细胞钙流增加，上清ROS分泌及661W感光细胞凋亡

结论  在rd小鼠视网膜变性过程中，趋化因子受体CCR5在小胶质细胞表面明显活化。ＣＣ趋化因子可能通过刺激CCR5使小胶质细胞活化产生ROS促使感光细胞凋亡。