目的 检测正常和年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中miRNA表达谱,分析比较表达差异,预测表达差异miRNA可能作用的靶基因。 方法 收集正常和年龄相关性白内障晶状体前囊膜,使用microarray技术分别检测这两种晶状体前囊膜上皮细胞中miRNA表达谱,筛选出表达差异miRNA,使用stem-loop RT-PCR对miRNA差异倍数进行验证,最后再使用特异性预测软件对表达差异miRNA可能作用的与晶状体相关的靶基因进行预测。 结果 正常和年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中有206种miRNA表达,正常晶状体中表达量最高的8种miRNA分别是miR-184,let-7b,miR-923,miR-1826,miR-125b,miR-1308,miR-26a和miR-638,在白内障晶状体中则为miR-184, miR-1826,let-7b/c,miR-24,miR-23b,miR-923和miR-23a;与白内障晶状体相比,正常晶状体中有32种miRNA表达量改变超过2倍,其中20种miRNA表达升高,12种表达降低;同时基因预测软件发现这些表达差异miRNA的部分预测靶基因mRNA是与晶状体的生长或疾病相关的。 结论 我们在国内外首次报道了正常和年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中miRNA表达谱,确定了表达差异miRNA,并预测了它们的可能靶基因,两组晶状体上皮细胞中miRNA的表达差异提示这些miRNA可能在晶状体的发育和白内障形成过程中发挥重要作用。 |