目的 以体外培养的人视网膜色素上皮细胞ARPE-19为研究对象,观察PDGF-BB对RPE细胞中MMP/TIMP的表达影响。 方法 1.不同浓度PDGF-BB(0ng/ml,0.1ng/ml,1ng/ml,10ng/ml,50ng/ml)刺激RPE细胞36h后,观察细胞的形态变化,并采用RT-RCR和Western blot分别检测RPE细胞中MMP-2、MMP-9及TIMP-1 mRNA和蛋白表达变化;2. 用浓度为10ng/ml的PDGF-BB刺激RPE细胞,观察不同的时间段(0h,24h,36h,48h)RPE细胞的形态变化,并采用RT-RCR和Western blot分别检测MMP-2、MMP-9及TIMP-1 mRNA和蛋白表达变化。 结果 1.RPE细胞中MMP-2和MMP-9的表达分别随着PDGF-BB浓度的增加和作用时间的延长而呈浓度依赖性和时间依赖性,但浓度为50ng/ml与浓度为10ng/ml时其表达无显著性差异(p>0.05),作用时间为36h和48h其表达无显著性差异(p>0.05)。 2.RPE细胞中TIMP-1的表达随着PDGF-BB浓度的增加而增加,随其作用时间的增加而增加,但增加趋势不明显,无统计学差异(p>0.05)。 结论 PDGF-BB可诱导RPE细胞中MMP/TIMP的表达变化,这可能为PDGF-BB促进PVR产生的另一作用途径。 |