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多重PCR对真菌性角膜炎快速诊断的探索         
多重PCR对真菌性角膜炎快速诊断的探索
作者:杨子建 王… 文章来源:河南省眼科研究所 点击数:1298 更新时间:2005/5/26 21:02:02
【摘要】目的 建立多重PCR体系快速诊断临床常见的致病真菌并鉴定到菌属。 方法 通过设计不同的属特异性引物,建立一个多重PCR体系对真菌性角膜炎常见的镰孢、曲霉、青霉及弯孢4个菌属的9种致病——菌腐皮镰孢菌,禾谷镰孢菌,木贼镰孢菌,串珠镰孢菌,烟曲霉菌,黄曲霉菌,黑曲霉菌,新月弯孢菌,牵连青霉菌的DNA进行检测,并将此方法应用于临床分离菌株的检测。 结果 经过多重PCR体系扩增后,琼脂糖凝胶电泳结果显示镰孢菌扩增出了长度为360bp的条带,曲霉菌扩增出了长度为430bp的条带,牵连青霉菌扩增出了长度为245bp的条带,新月弯孢菌扩增出了长度为300bp的条带。人基因组DNA及其他眼部常见的致病微生物DNA则未扩增出条带。表明本体系具有高度的特异性。将不同稀释梯度的模板加入反应体系中进行扩增,扩增产物在琼脂糖凝胶电泳下检测,结果显示本体系的敏感性为10fg。 结论 多重PCR体系可对临床常见致病真菌快速诊断并鉴定到菌属,方法快速,敏感,特异。
会议投稿录入:yzijianz    责任编辑:毛进 
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