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雌激素对过氧化氢诱导大鼠晶状体上皮细胞凋亡的抑制作用的实验研究 |
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作者:任玉玲 刘… 文章来源:四川大学华西医院眼科 点击数:1677 更新时间:2005/6/3 17:32:00
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目的:通过体外培养大鼠晶状体,探讨雌激素对实验性氧化损伤大鼠晶状体上皮细胞凋亡的影响。
材料和方法:体外培养健康成年Sprsgue-Dawley (SD)大鼠晶状体120个,分为雌、雄两组。雌性大鼠晶状体60个,雄性大鼠晶状体60个,置入无酚红DMEM培养液中培养。按培养液中添加的成分差异,再将两组透明晶状体分别随机分为4组: 空白对照组、17β-雌二醇(17β-E2)组、过氧化氢(H2O2)组、17β-E2+H2O2组。给予终浓度为500µmol/L 的H2O2复制白内障模型,加入终浓度为8µmol/L 的17β-E2干预。显微镜下动态观察各组晶状体混浊程度,并量化比较培养24、48、72小时后各组晶状体混浊程度差异。分别于培养24、48、72小时后,在显微镜下撕取各组晶状体前囊膜铺片,采用末端脱氧核糖核酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)检测各组晶状体上皮细胞凋亡及凋亡率。透射电子显微镜观察晶状体上皮细胞超微结构改变。
结果:实验发现,终浓度为500µmol/L的H2O2可诱导体外培养的大鼠晶状体形成白内障,随培养时间延长,晶状体混浊程度加重。终浓度为8µmol/L的17β-E2能够减轻雌性大鼠晶状体混浊程度,有统计学意义(P<0.05),但不能减轻雄性大鼠晶状体混浊程度(P>0.05)。雌性大鼠晶状体在17β-E2作用下能对抗氧化应激,减少上皮细胞凋亡率,H2O2组与17β-E2+H2O2组比较,两组细胞凋亡率差异有统计学意义(P<0.05)。17β-E2不能保护雄性大鼠晶状体对抗氧化应激,H2O2组与17β-E2+H2O2组比较,两组细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0.05)。雌性和雄性大鼠晶状体,空白对照组与17β-E2组比较晶状体混浊程度和细胞凋亡率,差异均无统计学意义(P>0.05)。培养72小时后的雌性大鼠晶状体上皮细胞超微结构研究显示,H2O2组晶状体上皮细胞绝大多数发生凋亡,呈凋亡各期形态学改变;17β-E2+H2O2组晶状体上皮细胞部分发生凋亡;正常对照组与17β-E2组很少晶状体上皮细胞发生凋亡。
结论:8µmol/L 的17β-E2对体外培养的大鼠晶状体在一定时间内无损伤作用。雌激素能够抑制H2O2诱导的雌性大鼠晶状体上皮细胞的凋亡,减轻晶状体的混浊程度,其作用具有性别差异。
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会议投稿录入:兰心 责任编辑:毛进 |
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