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纯眼组织对牛晶状体囊袋体外培养的研究 |
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作者:李秋明 王… 文章来源:郑州大学第一附属医院眼科(450052) 点击数:1614 更新时间:2005/6/3 19:32:43
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目的:创建一种新的后发障体外模型——纯眼组织的牛晶状体囊袋培养。在无血清、无培养液的条件下,用单纯眼组织原代培养牛晶状体上皮细胞,旨在更贴近体内环境,更真实地模拟体内后发障的过程,观察不同眼组织对后发障的影响,探讨后发障的形成机理。
方法:用管径1.0㎜的毛细玻璃管制成晶状体囊袋支撑环,并留出约4-6㎜的缺口。环形撕取晶状体前囊,制备成晶状体囊袋,将玻璃支撑环旋入并支撑囊袋。将晶状体囊袋放在培养皿中,分别加入纯房水、含2%皮质的房水、含2%玻璃体的房水,并用含2%胎牛血清的DMEM做对照,培养1~5周。分别观察囊袋透明度的改变,倒置显微镜下、Giemsa染色光镜下观察细胞增生情况,拍照记录,并以新鲜离体囊袋作为对照。观察不同眼组织对后囊细胞融合时间的影响。
结果:1.囊袋透明度的变化: 纯房水培养1周时,可见前囊淡淡的点片状混浊,后囊透明。3周时可见前囊出现片状透明区,5周时完全透明。添加晶状体皮质、玻璃体培养时,囊袋逐渐混浊,直至完全混浊。2.倒置显微镜观察: 单纯房水培养时,1周即可见点片状晶状体上皮细胞的凋亡、脱落。3周时,前囊及赤道区凋亡的细胞达到半数,呈现散在均匀片状无细胞透亮区。5周时几乎完全脱落。添加晶状体皮质、玻璃体培养时,可见晶状体上皮细胞移出,向成纤维细胞转化,向后囊移行直至后囊细胞达到完全融合。3.Giemsa染色光镜观察:单纯房水培养1周时染色,可见前囊及赤道区的细胞数量较正常的减少,细胞之间出现点片状无细胞区。3周时凋亡的细胞增多,细胞之间出现大片无细胞区。5周时,囊袋几乎见不到细胞,赤道区为一条粉红色的着色带,前囊为淡染的纤维膜。添加晶状体皮质、玻璃体培养时,可见赤道区的细胞向后囊迁移、增生,细胞体积增大,细胞间隙增宽,排列散乱,出现复层增生区,复层增生区中央的细胞变长、变细似成纤维细胞状。4.不同眼组织对后囊细胞融合天数的影响:纯房水组,无增生,无法融合。含2%皮质的房水组、含2%玻璃体的房水组、2%DMEM组,后囊细胞融合天数分别为14.4天、9.2天、5.8天。
结论:1.纯眼组织的囊袋培养是一种简便、有效的后发障模型,能更真实地模拟体内后发障的过程。2.纯眼组织的囊袋培养模型,揭示了单纯皮质或玻璃体即能促使后发障的形成,尤其是玻璃体的作用非常显著。纯房水抑制后发障的形成。
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会议投稿录入:liqiuming 责任编辑:毛进 |
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