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| 三氧化二砷对体外培养的人视网膜色素上皮细胞作用的实验研究 |
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作者：李秋明 … 文章来源：郑州大学第一附属医院眼科(450052) 点击数：1683 更新时间：2005/6/3 19:37:13 
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| 目的：研究三氧化二砷（As2O3）对体外培养的人视网膜色素上皮（retinal pigment epithelium,RPE）细胞的增生抑制及凋亡诱导作用，并观察不同生长状态下的人RPE细胞对As2O3的药物敏感性。
方法：细胞分血清组和无血清组，用不同浓度的As2O3处理细胞，倒置显微镜下观察细胞形态，四唑盐（MTT）比色法检测人RPE细胞对As2O3的药物敏感性，流式细胞仪检测As2O3作用血清组人RPE细胞后的细胞周期变化和凋亡率。
结果：As2O3对人RPE细胞形态学的影响：倒置显微镜下观察，对照组细胞呈贴壁生长，大小形态基本一致，悬浮细胞少。血清组细胞药物处理后细胞在低浓度(<25µmol/L)As2O3作用下部分细胞体积增大，形态不规则，悬浮细胞增多。25µmol/L As2O3作用人RPE细胞48h后细胞密度明显减小，细胞变圆，体积缩小，胞膜完整，胞质浓集，出现凋亡细胞形态。高浓度(50µmol/L)As2O3作用后细胞大部分或全部死亡。无血清组细胞药物处理后在大于25µmol/L As2O3作用下出现明显细胞悬浮，部分细胞体积变大，未出现凋亡细胞形态改变。体外药物敏感性实验—MTT比色法结果：不同浓度的As2O3作用血清组人RPE细胞不同时间后，细胞生长可受到不同程度的抑制，不同作用时间各实验组与对照组之间吸光度比较有统计学意义的药物剂量分别为：作用24h为6.25µmol/L (P=0.018)，48h为6.25µmol/L（P<0.001），72h为1.56 µmol/L (P<0.001)，细胞增生抑制率随浓度增加和时间延长而逐渐升高。作用无血清组细胞48h后在12.5µmol/L 浓度时抑制作用有统计学意义（P<0.001）。细胞周期及凋亡率的测定：流式细胞仪分析结果显示1.56 ~12.5µmol/L范围内，As2O3作用人RPE细胞周期改变表现为S期阻滞，6.25µmol/L作用时尤其显著。而25µmol/L As2O3则表现G2/M期明显延长。As2O3处理人RPE细胞后出现典型亚二倍体峰—凋亡峰。细胞凋亡率随浓度增加而升高，随作用时间关系不明显。
结论：As2O3可抑制体外培养的人RPE细胞的生长并诱导其凋亡。不同生长状态下的人RPE细胞对As2O3的敏感性不同，在6.25～12.5µmol/L之间，生长快速的血清组人RPE细胞对As2O3的药物敏感性大于生长缓慢的无血清组细胞。为使用该药物进行下一步实验及在临床眼科局部应用该药物防治增生性玻璃体视网膜疾病提供理论依据和实验数据。
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| 会议投稿录入：liqiuming 责任编辑：毛进 |
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