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| 羊膜对体外培养的兔视网膜Müller细胞增殖影响的实验研究 |
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作者：郝玉华 … 文章来源：河北医科大学第二医院眼科 050000 点击数：1224 更新时间：2005/6/5 17:31:20 
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| 目的：在孔源性视网膜脱离，包括视网膜胶质细胞在内的多种细胞的增殖和移行，是形成脉络膜视网膜粘连，封闭视网膜裂孔的关键。Koizumi等研究表明，羊膜上皮细胞和基底膜内含有大量的生长因子如EGF、HGF、KGF、bGFG、TGF-β，且某些生长因子如EGF、bFGF可促进视网膜胶质细胞的增殖和移行。我们采用体外培养兔视网膜Müller细胞，在培养过程中加入不同浓度的羊膜匀浆，观察羊膜对体外培养的兔视网膜Müller细胞增殖能力的影响，探讨羊膜用于治疗孔源性视网膜脱离的潜在可能性。方法：1、取第四代经免疫组化和电镜鉴定的兔视网膜Müller细胞，以3X104/ml密度接种于24孔板，3孔/组，培养24小时后，加入不同浓度羊膜匀浆（800、400、200、100ug/ml）继续培养24小时，胰蛋白酶消化，细胞计数，绘制剂量效应曲线。2、取第四代兔视网膜Müller细胞，以3X104/ml接种于24孔板，3孔/组，24小时后，每孔加入羊膜匀浆（800ug/ml）条件培养基，孵育12、24、36、48、72、96小时后检测，绘制时间效应曲线。3、取第四代兔视网膜Müller细胞以3×104/ml接种于96孔板，200ul/孔，24小时后加入不同浓度羊膜匀浆条件培养基（800、400、200、100ug/ml），培养24、48、96小时后，用MTT法检测Müller细胞增殖率。4、第四代兔视网膜Muller细胞以4×104/ml密度接种于预置有盖玻片的6孔板中，24小时后加入不同浓度的羊膜条件培养基，继续培养48小时后，免疫组化PCNA检测。结果：随着条件培养基中羊膜匀浆浓度的增加，对兔视网膜Müller细胞的增殖效应逐渐增强，800ug/ml时获得最大增殖效应，细胞增殖率为62.5%；在羊膜匀浆浓度恒定条件下，随着时间延长，其对视网膜Müller细胞的增殖效应逐渐加强，在48小时即大到较高的增殖效应，72、96小时与48小时相比无显著差异。细胞增殖抗原检测结果，800ug/ml组和400ug/ml组PCNA抗原阳性表达率与对照组相比具有显著性差异。结论：羊膜对体外培养的兔视网膜Müller细胞具有促进增殖作用，且呈浓度和时间倚赖性。羊膜治疗孔源性视网膜脱离具有潜在可能性。
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| 会议投稿录入：yuhuah 责任编辑：毛进 |
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