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| 视网膜色素上皮细胞多种复合培养模型的建立 |
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作者：韩泉洪 文章来源：天津市眼科医院 点击数：1625 更新时间：2005/6/6 23:09:32 
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| 目的：为模拟视网膜色素上皮（RPE）细胞在眼内多种病理条件下的状态，制作RPE细胞的定量损伤、受力牵拉、电场负载以及复制衰老模型，以利于研究眼内多种病理条件下RPE细胞的细胞生物学特性。
方法：（1）定量损伤模型：培养融合的单层RPE细胞，用直径6mm的角膜环钻放在培养板上，力量适中，以能获得压痕，从上方伸入消毒棉签将环钻覆盖区内细胞轻轻刮去，轻柔冲洗脱落细胞；（2）受力牵拉模型：首先进行磁珠包被，将Ⅰ型胶原吸附在磁珠上，然后将此复合物加入培养RPE细胞中，在培养箱中孵育48小时后，洗除未结合的磁珠，然后以一块矩形永磁铁给细胞施加垂直方向磁场作为牵拉模型；（3）电场负载模型：特制细胞培养小室，两端施加6V/cm的电压作为电场负载模型；（4）复制衰老模型：培养RPE细胞通过增加传代次数的方法，制作出复制衰老细胞大于总数80％RPE复制衰老模型，并以β－半乳糖苷酶活性检测；
结果：（1）定量损伤模型可以获得有固定损伤量的RPE损伤模型，可以帮助定量检测RPE损伤后细胞因子、基因等的表达；（2）用磁力方法制作的受力牵拉模型，通过检测模型中细胞因子的表达及其抑制因素，可以帮助发现视网膜脱离过程中参与的细胞因子和相关因素；（3）通过电场负载，可以发现RPE细胞发生形态、分布、移行以及细胞骨架的变化，且这些变化与电场相关；（4）培养20代的RPE细胞中可见阳性细胞数目为87％，可以作为RPE细胞复制衰老模型；
结论：通过以上特殊条件模型的建立，可以模拟视网膜脱离前期、视网膜脱离后以及电场作用下的RPE状态，同时复制衰老模型对于老年性黄斑变性的研究有一定意义。
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| 会议投稿录入：hudou 责任编辑：毛进 |
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