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| 底物诱导对视网膜Müller细胞谷氨酸转运体GLAST的调控 |
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作者：夏晓波 周… 文章来源：中南大学湘雅医院眼科 点击数：1366 更新时间：2005/6/13 21:42:04 
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| 目的：研究底物谷氨酸对视网膜Müller细胞谷氨酸转运体GLAST的调控作用。
方法：（1）采用L-3H-谷氨酸摄取分析方法研究底物诱导对GLAST活性影响。并提取细胞总蛋白，采用Western blot方法分析视网膜Müller细胞GLAST蛋白质表达量的变化。（2）采用台盼蓝染色及血球计数板进行Müller细胞活细胞计数，分析100µM谷氨酸对视网膜Müller细胞存活的影响。然后采用CCK-8（Cell Count Kit 8）细胞毒性分析实验，通过测定450nm波长的吸光度值，观察不同浓度和不同时间内谷氨酸对Müller细胞存活的影响。
结果：（1）在培养的鼠视网膜Müller细胞中加入不同浓度的谷氨酸（5µM～1000µM）培养30分钟后，发现随着底物谷氨酸浓度增加，L-3H-谷氨酸的摄取量增加，当谷氨酸浓度为100µM时，L-3H-谷氨酸摄取量最大。随着谷氨酸浓度的增加，谷氨酸转运体GLAST蛋白质的表达量增加，当谷氨酸浓度为100µM时，GLAST蛋白质表达量达最大。（2）在含有和不含有100µM谷氨酸的无血清培养液中培养鼠视网膜Müller细胞10天，发现两组活细胞数比较差异无显著（P>0.05）。在培养的Müller细胞中加入不同浓度的谷氨酸培养4小时和18小时后，加入CCK-8培养4小时,发现不同时间、不同浓度的谷氨酸处理后的Müller细胞的吸光度值与对照组比较差异无显著性（p>0.05）。
结论：谷氨酸的底物诱导可增加GLAST摄取活性，且上调GLAST蛋白质的表达。谷氨酸对视网膜Müller细胞的存活无明显影响。
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| 会议投稿录入：squireel 责任编辑：毛进 |
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