| 目的 探讨羊膜移植对Balb/c小鼠感染单纯疱疹病毒－1（HSV-1）后基质金属蛋白酶-2、-8﹑-9及组织金属蛋白酶抑制剂TIMP-1﹑TIMP-2表达变化及其在单疱病毒角膜炎病程中所起的作用。方法：6 至8 周龄雌性BalB/c小鼠40只,实验前双眼前节检查正常。将小鼠随机分为实验组和对照组。采用乙醚吸入法麻醉两组小鼠,每只鼠均取右眼为实验眼。显微镜下十字交叉搔刮右眼角膜上皮后点滴Ⅰ型单纯疱疹病毒( herpes simplex virus－Ⅰ)5μl (105PFU)于角膜上,按摩眼球并滞留20s。感染眼每日用氯霉素滴眼液滴眼。对实验组小鼠右眼角膜感染上HSV-1后24h行羊膜移植术。分别在HSV-1感染后和羊膜移植后的2、7、14天，分别在各时间点用颈椎脱臼法处死两组小鼠，迅速摘除右眼球，做好时间标记，用中性福尔马林固定，常规脱水，二甲苯透明，进行石蜡包埋，3um连续切片，常规脱蜡，捞片，60℃烤片，过夜后行免疫组织化学染色。阴性对照以PBS代替兔抗小鼠MMP-2、MMP-8、MMP-9及TIMP-1﹑TIMP-2多克隆抗体，方法照旧。通过免疫组织化学染色方法和计算机图像分析系统检测小鼠感染HSV-1后MMP-2、MMP-8、MMP-9及TIMP-1﹑TIMP-2在角膜中的分布及其平均吸光度值。探讨它们在单疱病毒性角膜炎（HSK）发展过程中所起的作用。结果 在对照组，角膜中MMP-2、MMP-8、MMP-9及TIMP-1﹑TIMP-2在第二天出现表达且表达主要位于浅表基质层及上皮下的炎性细胞中。感染后第14天可见坏死性角膜炎及角膜溃疡形成,同时角膜基质和浸润的炎性细胞中尤其溃疡处,可见MMP－2、MMP－9 及TIMP－1﹑TIMP-2 表达显著增加。溃疡区域有大量MMP-8阳性染色的中性粒细胞。实验组各时间点明胶酶(MMP-2、-9) 活性和胶原酶(MMP-8) 活性均低于对照组，TIMPS表达高于对照组。结论：行羊膜移植可抑制角膜细胞和浸润的炎性细胞分泌产生MMPs ，促进TIMPS表达，可能对上皮性角膜炎与溃疡形成过程起重要的抑制作用。 |
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