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睫状神经营养因子和腺病毒介导脑源性神经营养因子对大鼠视神经损伤修复的作用 |
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作者:崔志利 胡… 文章来源:中国人民解放军第四军医大学西京医院眼科 点击数:1475 更新时间:2005/6/15 0:00:52
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目的:(1)通过观察SD大鼠视神经夹伤后视网膜上生长相关蛋白-43(GAP-43)蛋白和基因的表达变化,了解玻璃体腔内注射睫状神经营养因子(CNTF)和腺病毒介导脑源性神经营养因子(Ad-BDNF)对视神经损伤、修复和再生的作用;(2)通过经上丘注射荧光金(FG)逆行标记视网膜神经节细胞(RGC)进行计数,观察SD大鼠视神经夹伤后玻璃体腔内注射CNTF和Ad-BDNF对视神经损伤后RGC存活的作用。
方法:应用蛋白电泳和免疫印迹法检查CNTF和Ad-BDNF对视神经夹伤后视网膜生长相关蛋白表达的影响;应用原位杂交方法检测CNTF和Ad-BDNF对视神经夹伤后GAP-43基因表达的影响;应用FG逆行标记RGC,全视网膜铺片RGC计数观察CNTF和Ad-BDNF对视神经夹伤后RGC存活的影响。
结果:正常成年SD大鼠视网膜上GAP-43呈现低表达,分子量约为47KD;正常成年SD大鼠视网膜上仅在节细胞层检测到少数细胞存在GAP-43mRNA杂交信号;经上丘注射荧光金后7天标记的正常成年SD大鼠视网膜上RGC数为2155±265个/mm2(n=12)。
结论:1. 正常SD大鼠视网膜上GAP-43呈现低表达,分子量约为47KD;正常情况下仅在节细胞层能检测到个别细胞存在GAP-43mRNA杂交信号;视网膜上RGC数为2155±265个/mm2。2. 模型中视神经夹伤后早期可以看到作为神经修复和再生标志的GAP-43及其基因的增强表达,说明视神经本身对于损伤有修复和再生的反应。3. 由逆行标记RGC计数可以看出视神经夹伤后RGC的死亡主要发生在神经损伤后2周以内。4. 大鼠视神经夹伤后玻璃体腔内注射重组人CNTF在视神经夹伤后早期能够提高视网膜上GAP-43的表达,并且能在夹伤后早期保护RGC的死亡,但这种作用不持久,视神经夹伤2周以后基本消失。5. 大鼠视神经夹伤后玻璃体腔内注射重组人Ad-BDNF在视神经夹伤后能够提高视网膜上GAP-43蛋白及其基因的表达,并且能够保护视神经夹伤后RGC的死亡,这种作用可以持续到夹伤后4周。
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会议投稿录入:崔志利 责任编辑:毛进 |
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