| 目的：实验性自身免疫性葡萄膜视网膜炎（experimental autoimmune uveoretinitis, EAU）是CD4＋T细胞介导的器官特异性自身免疫病，是研究人类葡萄膜炎的常用的模型。可诱导的共刺激分子（inducible co-stimulator, ICOS）是新发现的CD28家族成员，其配体之一－B7相关蛋白（B7 related protein-1, B7RP-1）属于B7家族。这对新的共刺激分子在T细胞的存活和分化中起到关键作用。本研究旨在探讨ICOS在EAU中的表达及其意义。
方法：用离子交换层析法自行从新鲜牛视网膜中提取视网膜S－抗原，纯化后与弗式完全佐剂1：1混合（含S－抗原100μg），免疫雌性6－8周龄Lewis大鼠，制作EAU模型，分别于免疫后7，12，15，21天（每组6只）处死动物，取视网膜、腹股沟淋巴结、脾脏用于以下实验。提取脾脏组织的ICOS mRNA, 用荧光定量PCR的方法测定其基因表达；提取脾脏组织ICOS及其配体B7RP－1蛋白，用Western Blot方法测定其蛋白表达；用流式细胞仪测定ICOS与CD4及活化CD4细胞（以CD25为新近活化T细胞标记）之间的关系；用免疫组化方法检测对照组和S－抗原免疫后各时间点组的大鼠脾脏ICOS阳性细胞的分布和数量；磁珠分选ICOS＋细胞，S－抗原体外刺激48小时后测定培养上清中IFN-γ的量。结果：运用荧光定量PCR，Western Blot方法检测到各实验组以及正常对照组大鼠ICOS的基因和蛋白均有表达，免疫后7天基因和蛋白表达水平升高，免疫后15天（EAU高峰期）表达量最高，免疫后21天（EAU消退期）表达量下降。双色流式方法证实在EAU中ICOS＋细胞大部分是CD4＋细胞；而ICOS＋细胞数量随EAU加重而增加，减轻而减少；并且CD4+ICOS+/CD4比例亦随炎症加重而增加。脾脏组织切片免疫组化研究证实，ICOS＋细胞的数量变化与EAU病程呈正相关。三色流式方法证实ICOS＋细胞主要表达在活化的CD4＋T 细胞上。免疫磁珠方法分选ICOS＋细胞，用S－抗原刺激48小时后，用ELISA方法检测到上清中ICOS＋细胞分泌大量IFN-γ。结论：ICOS＋细胞主要是CD4+ T细胞，参与EAU的发生、发展、高峰、消退的全过程，是EAU的主要效应细胞。
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