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| TFPI-2基因原位转染抑制兔角膜新生血管形成 |
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作者：袁 静 … 文章来源：华中科技大学同济医学院附属协和医院眼科 430022 点击数：1705 更新时间：2004/5/25 
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| 目的 组织因子途径抑制物2（tissue factor pathway inhibitor-2, TFPI-2）是一种新近发现的丝氨酸蛋白酶抑制物，对维持细胞外基质完整性有重要作用。本研究旨在探讨局部转染TFPI-2基因后角膜组织TFPI-2的表达及转染前后角膜新生血管形成变化，为角膜新生血管的基因治疗提供实验依据。方法：TFPI-2基因经KPnⅠ和XbaⅠ酶切鉴定，碱变性法大量扩增质粒；兔角膜新生血管模型经75% AgNO3 和 25% KNO3烧灼后建立，60只新西兰大白兔随机分为3组，I组为单纯建立兔角膜新生血管模型，II组术后局部转染真核表达载体PEF-BOS-CITE，III组为术后局部转染质粒PEF-BOS-TFPI-2，每组按实验终点（术后3，5，7，10，14天）随机分为5个亚组，观察角膜新生血管形成变化；术后两周取角膜组织经RT-PCR方法检测各组角膜组织TFPI-2的表达。结果：PEF-BOS-TFPI-2质粒经酶切鉴定含有TFPI-2基因，碱变性法获得大量纯化质粒；原位转染TFPI-2质粒组兔角膜新生血管形成较I组明显减轻，其抑制率于第3，5，7，10，14天分别为28.7%，34%，38%，41.2%，43%，I、II组之间比较无显著差异；RT-PCR检测I组、II组、III组角膜组织IATFPI-2/IAβ-Actin分别为0.62±0.03、0.59±0.03、0.81±0.04，I组、II组与III组比较TFPI-2基因表达有显著性差异。
结论：局部转染TFPI-2基因可抑制兔角膜新生血管的发生及发展；质粒PEF-BOS-TFPI-2含有TFPI-2基因，局部转染后其角膜组织表达TFPI-2升高，通过抑制MMPs的活性而阻止ECM的降解，从而为角膜新生血管的基因治疗提供实验依据。
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| 会议投稿录入：毛进 责任编辑：毛进 |
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