| 【摘要】 目的 视网膜色素上皮（RPE）细胞在眼的代谢中起重要作用。结缔组织生长因子（connective tissue growth factor, CTGF）具有广泛的生物学作用，参与机体许多正常和病理状态下的功能活动。本实验观察RPE细胞在CTGF刺激时Ca2+信号变化情况，研究CTGF对RPE细胞内钙信号传导的作用。方法 用激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）测定CTGF及联合应用8-溴-cAMP(8-Br-cAMP)或地塞米松(DEX)对fluo-3/AM负载的RPE细胞内游离Ca2+浓度（[Ca2+]i）的影响。结果 CTGF可以剂量依赖性刺激RPE细胞内游离Ca2＋浓度的升高，高峰值持续约40―60秒即迅速恢复到基线水平；20nM EGTA预处理RPE细胞30min后, rhCTGF(100ng/mL)刺激细胞，[Ca2+]i仅能轻度升高，进一步再加入12.5 mM Cacl2 至无钙环境中，可见rhCTGF诱导一个非常明显和持久的[Ca2+]i升高。DEX(10ug/mL)或8-Br-cAMP(10-4M)分别和rhCTGF一同处理细胞，可以明显抑制CTGF诱导的[Ca2+]i的升高，抑制率分别为51.06% 和50.02%。结论 CTGF刺激RPE细胞内Ca2+信号传导通路，CTGF诱导的[Ca2+]i的升高涉及两种机制：细胞内钙库的释放和细胞外Ca2+的内流。8-Br-cAMP和DEX对CTGF诱导的[Ca2+]i的升高有抑制作用。 |
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