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人羊膜上皮细胞体外培养重建角膜上皮的实验研究 |
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作者:陈剑,刘… 文章来源:510630 暨南大学附属第一医院眼科 点击数:896 更新时间:2007/5/24 7:57:26
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目的:探讨人羊膜上皮细胞体外重建角膜上皮的可能性。方法:取足月产人羊膜,通过胶原酶II、胰蛋白酶和EDTA消化获得人羊膜上皮细胞,将细胞在体外培养扩增、传代,每天在倒置显微镜下观察。将2-3代人羊膜上皮细胞,接种于去上皮的兔角膜基质上培养,待细胞融合形成单层后,置于插入式培养皿中进行气液界面培养14天。对角膜基质上培养的上皮细胞进行HE、扫描电镜、透射电镜进行形态学及超微结构观察,以及角蛋白K12的免疫组织化学检测。结果:人羊膜上皮细胞可在体外成功培养及传代,在体外可传6-8代。培养的人羊膜上皮细胞呈扁平不规则多角形,轮廓清晰,胞浆丰富,胞核呈圆形、卵圆形。人羊膜上皮细胞可在兔角膜基质上生长,培养1-2天可形成单层,气液界面培养14天可形成4-5层细胞的复层上皮,扫描电镜观察细胞表面有丰富的微绒毛,透射电镜下可见上皮细胞之间有桥粒连接,免疫组化检测复层细胞表达角蛋白K12,所形成的复层结构与正常角膜上皮相似。结论:人羊膜上皮细胞有可能用于组织工程角膜上皮重建。
本课题受以下基金资助:广东省重大科技计划项目(2003A3020104),国务院侨办重点学科基金项目(51205004) |
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会议投稿录入:liuxy988 责任编辑:毛进 |
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