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腺相关病毒介导色素上皮衍生因子转染人虹膜色素上皮细胞的体外研究           ★★★
腺相关病毒介导色素上皮衍生因子转染人虹膜色素上皮细胞的体外研究
作者:赵莼 文章来源:上海同济大学医学院附属第十人民医院眼科 点击数:281 更新时间:2011/9/13

目的 探讨以腺相关病毒AAV为载体对体外培养的人虹膜色素上皮细胞IPE进行色素上皮衍生因子PEDF转染,获得高效表达PEDF转基因细胞的可行性。
方法
  构建携带PEDF基因的重组腺相关病毒AAV载体AAV-PEDF,体外培养人IPE,用浓缩的病毒感染体外培养的IPE,荧光显微镜下观察细胞表达绿色荧光蛋白情况,并用流式细胞术检测细胞转染效率;RT-PCRWestern blotting等方法鉴定PEDFIPE中的表达。
结果
AAV-PEDF转染后,IPE生长正常,用荧光显微镜、RT-PCRWestern blotting等均能检测到PEDF表达,在转染倍数(MOI20时,细胞感染阳性率可达64.2%
结论 AAV-PEDF能有效地转染体外培养的IPE细胞并有效表达PEDF

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