目的 探讨外源性睫状神经营养因子(ciliary neurotrophic factor, CNTF)对新生期小牛视网膜神经细胞中bcl-2和c-fos 蛋白表达的影响,为预防和治疗退行性视网膜疾病提供参考依据。
方法 以新生小牛视网膜为研究对象,传代培养视网膜神经细胞,细胞传至第二代对数生长期时,在接种后第3天分别加入终浓度为50ng/ml的CNT,检测给药后第2、4、6天后bcl-2和c-fos蛋白的表达变化情况。
结果 在正常对照组,bcl-2蛋白的表达强度(用相对灰度值表示,下余同)为0.314、0.300、0.302。在CNTF组,bcl-2蛋白的表达在给药后2、4、6天呈现逐渐下降的趋势。在三个时间点,CNTF组bcl-2蛋白的表达强度为0.502,0.389,0.320(高→低→低)。在给药后2天CNTF组bcl-2蛋白的表达强度明显高于正常对照组,到6天时与正常对照组已无明显差异。在正常对照组,c-fos蛋白的表达强度为0.471、0.510、0.498。在CNTF组,c-fos蛋白的表达在给药后第2、4、6天呈现较为稳定的趋势,且与正常对照组没有明显的变化。在三个时间点,CNTF组c-fos蛋白的表达强度为0.452、0.517、0.505。
结论 CNTF能够有效抑制新生小牛视网膜神经细胞凋亡,增强细胞生长活性。CNTF对于新生小牛视网膜神经细胞内bcl-2蛋白的表达具有短期促进作用,对c-fos蛋白的表达未有显著影响。结果提示CNTF主要通过增强细胞抗凋亡蛋白表达来延缓视网膜神经细胞的凋亡和死亡,进而促进细胞存活,起到神经保护和神经修复的作用。 |