目的 观察高糖环境对角膜内皮细胞形态的影响,探讨F-肌动蛋白在高糖环境中含量、结构、及其力学的改变。
方法 用细胞培养的方法模拟体内高糖环境,原代培养兔角膜内皮细胞,用倒置相差显微镜、流式细胞仪、透射电镜、激光共聚焦显微镜和原子力显微镜,对不同浓度组(0mmol/L、10mmol/L、20mmol/L、30mmol/L、40mmol/L、50mmol/L)进行形态学观察以及F-肌动蛋白含量,结构及力学进行分析比较。
结果 随着培养基中葡萄糖浓度的增加,角膜内皮细胞出现了肿胀,六边形细胞比例减小,细胞凋亡增多,F-肌动蛋白含量减少;透射电镜下观察发现线粒体肿胀,嵴消失,粗面内质网扩张,线粒体出现空泡变性;共聚焦显微镜显示细胞骨架的完整性受到破坏;原子力显微镜显示细胞的形貌发生改变以及细胞表面的粘弹力也受随葡萄糖浓度的变化而增大。
结论 高糖对角膜内皮细胞存在影响,提示糖尿病病人角膜内皮细胞的修复和代偿能力下降。 |