目的 探讨体外诱导人骨髓基质干细胞(hMSCs)向上皮样细胞定向分化用于构建组织工程结膜的可能性。
方法 采用Transwell非接触共培养法诱导hMSCs向hCjEs定向分化;倒置相差显微镜每日观察细胞的形态变化;免疫细胞化学和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测分化细胞中角蛋白13(CK13)的表达;以分化细胞作种子细胞、脱细胞结膜基质为载体,构建组织工程结膜;RT-PCR 和western blot分别从基因和蛋白水平检测CK13和MUC5AC在组织工程结膜的表达,并用正常结膜组织做对照。
结果 分化细胞逐渐由长梭状向上皮样细胞形态变化,免疫细胞化学和RT-PCR分别在蛋白和基因水平证实分化细胞表达CK13;RT-PCR和 western blot 结果分别在基因和蛋白水平证实本研究构建的组织工程结膜表达CK13和MUC5AC;与正常结膜组织CK13和MUC5AC的表达相似。
结论 在一定条件下,hMSCs可向具有结膜上皮细胞表型的上皮样细胞定向分化;以分化细胞作种子细胞构建的组织工程结膜具有与结膜组织相似的生理功能。 |