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汞致白内障过程中HSP70和MT-Ⅱ蛋白表达变化           ★★★
汞致白内障过程中HSP70和MT-Ⅱ蛋白表达变化
作者:谢艳 文章来源:中南大学湘雅三医院眼科 点击数:394 更新时间:2011/9/13
目的
方法 
选用体重约350g-400g的成年雄性SD大鼠56只随机分为三组,低浓度组(24只)、高浓度组(24只)和对照组(8只)。将实验组大鼠在玻璃箱中进行静式吸入染毒,每日30分钟,每周6天。低浓度组吸入最高浓度为0.01mg/m3,高浓度组吸入浓度为3 mg/m3。正常对照组不予任何处理。在第一次染毒后第7142128天分别取材14鼠(低浓度组6只、高浓度组6只、对照组2只)。全身麻醉后取一只眼球分离晶状体置液氮中用于做Western BlottingHSP70 MT-的表达;将大鼠全身用4%多聚甲醛溶液灌注固定后取另一眼球用于做免疫组化检测HSP70MT-Ⅱ的表达。
结果 1.不同时期裂隙灯下观察晶状体浑浊度:对照组晶体透明无变化;低浓度染毒组第3周出现部分大鼠晶体前囊少量点状混浊,第4周出现晶体前囊点状混浊;高浓度染毒组第3周出现前囊浅灰色点状混浊,第4周出现前囊点状混浊伴皮质轻度混浊。2.免疫组化检测和Western Blotting检测提示 HSP70在对照组中和实验组中的晶状体上皮细胞表达有显著性差异,低浓度组与高浓度组表达有差异,与浓度及时间均有相关;MT-Ⅱ在对照组和实验组的表达有差异,与时间相关,随时间延长依次递增,与浓度无明显相关; HSP70MT-Ⅱ在晶体上皮细胞中的表达存在正相关性。
结论 热休克蛋白HSP70与金属硫蛋白MT-Ⅱ在汞中毒性白内障晶体上皮细胞中均有阳性表达,且两者之间存在正相关性,提示HSP70MT-Ⅱ在汞中毒性白内障的发生发展过程中均有一定的影响,HSP70MT-Ⅱ的相互作用关系可能在汞中毒性白内障的发展过程中发挥了作用。检测暴露于不同浓度汞蒸汽后大鼠晶状体中热休克蛋白70HSP70)、金属硫蛋白(MT-)表达含量的变化,探讨其在汞中毒性白内障形成中的作用和意义。
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