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Cacna1f基因突变对CSNB大鼠视网膜早期发育的影响           ★★★
Cacna1f基因突变对CSNB大鼠视网膜早期发育的影响
作者:安晶 文章来源:第四军医大学航空航天医学临床医学教研室 点击数:414 更新时间:2011/9/13
目的 CACNA1F发生突变,其编码的Cav1.4钙通道蛋白在视网膜中的表达量变化,导致了CSNB2疾病的发生。本研究探讨了CACNA1F基因突变对CSNB模式大鼠视网膜的确切影响部位以及影响发生时间。
方法 采用视觉电生理技术检测CSNB大鼠发育早期的视觉功能,以及组织形态学、免疫组织化学方法观察睁眼前后基因突变大鼠的视网膜发育情况。
结果 在睁眼前1天、睁眼当天,野生型大鼠与CSNB大鼠ERG明适、暗适反应较相似。野生型大鼠睁眼后2天,视杆反应(rod ERG)出现, 最大混合反应(Max ERG)出现b波,出现明适反应(Photopic ERG),OPs子波潜时较前期缩短、幅值增大;2天后波形变化不大,仅各项波形幅值增大、潜时延长。CSNB大鼠ERG波形与睁眼前波形一直较相似;出生后第26天(Postnatal 26,P26)CSNB大鼠Photopic ERG明显。大鼠睁眼前后视觉功能发育曲线显示:从睁眼前一天到P26,野生型大鼠与CSNB大鼠Max ERG的a波幅值无明显差异,但CSNB大鼠潜伏期均延长(P < 0.05);野生型大鼠Photopic ERG较CSNB大鼠幅值高、潜时短(P < 0.01)均有统计学意义;畸形OPs波第一个向下波波幅比较,睁眼第2天后CSNB大鼠幅值较野生型大鼠显著下降(P < 0.05);两组大鼠的Flicker ERG在睁眼前1天就出现,野生型大鼠睁眼4天以后幅值显著增加(P < 0.01)。HE染色显示两种大鼠视网膜形态结构的发育较相似。在睁眼时两种大鼠的视网膜AZ内的突触相关蛋白SYN与CtBP2,未见明确点状表达;睁眼后2天野生型大鼠的SYN与CtBP2较明确,而CSNB大鼠的两种蛋白表达仍不明确;以后各时期CSNB大鼠的两种蛋白表达均较野生型大鼠减少;SYN与CtBP2两者相互伴行,且表达量随视网膜早期发育而增加。两种大鼠的视杆双极细胞数量相似;睁眼时两种大鼠视杆双极细胞突触数量相似;睁眼后2天,野生型大鼠视杆双极细胞突触开始较CSNB大鼠增多。
结论 从睁眼后2天开始野生型大鼠与CSNB大鼠ERG差别增大,此前两者ERG表型相似。CSNB大鼠视杆双极细胞树突发育进程异常,CSNB大鼠AZ上突触相关蛋白表达下降。提示了Cacna1f基因突变的致病时间可能发生在睁眼后两天以前,作用部位为视网膜突触AZ。
 
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