目的 研究局部补体因子H(complement factor H, CFH)在大鼠脉络膜新生血管形成(Choroidal neovascularization, CNV)中的调控作用,以期寻求新的靶点治疗新生血管性老年黄斑变性。
方法 建立激光诱导BN(Brown Norway)大鼠脉络膜新生血管模型,通过眼底荧光血管造影(Fundus Fluorescein angiography, FFA)及iso-lectinB4荧光染色明确CNV形成。在建模后7d、14d,采用免疫组化检测补体系统膜攻击复合物(C5b9, MAC)的表达,Western-Blot及RT-PCR检测CFH在蛋白水平及分子水平表达的差异。体外筛选高效特异抑制CFH基因表达的siRNA-CFH后,通过玻璃体腔微注射使CFH基因表达沉默后(1d、3d、5d),观察大鼠CNV形成以及补体系统激活的膜攻击复合物表达的不同。
结果 脉络膜新生血管BN大鼠模型建立7d后,视网膜色素上皮-脉络膜复合体中发现CFH的表达较基线及激光后14d有所降低(P<0.05),MAC的表达在激光后7d达到峰值;与空白对照组、非特异性siRNA对照组及GS对照组比较,siRNA-CFH组的CFH表达水平降低,isolectin-B4荧光染色显示CNV的形成在siRNA-CFH组和空白对照组/GS对照组中有统计学差异。
结论 本研究证实了CFH在视网膜色素上皮-脉络膜复合体上的表达,CFH的抑制可促进视网膜色素上皮-脉络膜复合体局部补体系统的激活,从而诱导了脉络膜新生血管的形成。为寻求新的治疗新生血管性老年黄斑变性的靶点提供了理论基础。 |