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tTG反义药物的设计及其对小梁细胞tTG表达的影响 |
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作者: 张海江 … 文章来源:湖北省宜昌市中心人民医院 点击数:1429 更新时间:2005/5/27 20:47:56
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摘要 目的:通过计算机程序模拟组织型谷氨酰胺转移酶 (tissue transglutaminase, tTG)基因的mRNA二级结构,优化反义寡核苷酸 (antisense oligodeoxynucleotide, ASODN)药物设计,为有效抑制小梁细胞表达tTG提供新的途径。方法:根据牛tTG mRNA的二级结构,选择环区(1496-1516)、环与茎结合区(280-300) 和茎区(2720-2740)作为反义药物作用的靶点,分别合成ASODN1、 ASODN2、ASODN3,用脂质体包埋后转染牛眼小梁细胞。通过半定量RT-PCR法检测转染后tTG mRNA表达的变化来评价tTG-ASODN的生物学效应。结果tTG-ASODN1、tTG-ASODN2、tTG-ASODN3对tTG mRNA的表达均有抑制作用,与空白对照组相比有显著性差异(P<0.05),且tTG-ASODN1与tTG-ASODN2的抑制作用明显强于tTG-ASODN3(P<0.05)。结论 选择环区或环与茎连接的部位作为反义作用的靶点,其反义作用明显强于其他区域。从机制上讲,可能是因为环区或环与茎连接的部位的形成需要吸收能量,是整个tTG mRNA序列中最不稳定的区域,ASODN容易接近而发挥作用,提示通过tTG mRNA二级结构的模拟是设计反义药物的新途径。 |
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会议投稿录入:risking023 责任编辑:毛进 |
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